天津工业大学潘杰获国家专利权
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龙图腾网获悉天津工业大学申请的专利双重酶响应纳米胶束的制备获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116236589B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-12发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202111479770.5,技术领域涉及:A61K47/64;该发明授权双重酶响应纳米胶束的制备是由潘杰;朱启南;万冬设计研发完成,并于2021-12-07向国家知识产权局提交的专利申请。
本双重酶响应纳米胶束的制备在说明书摘要公布了:本发明主要涉及肿瘤研究和治疗领域,具体是一种双重酶响应智能型抗癌纳米胶束的制备方法。该方法包括以下步骤:1TPGS3350‑GPLGVR的制备;2TPGS3350‑GPLGVR‑DOX的制备;3FA‑DEVD的制备;4FA‑DEVD‑DOX的制备;5用透析法制备TPGS3350‑GPLGVR‑DOX&FA‑DEVD‑DOX胶束,最终得到具有双重酶响应的抗癌纳米胶束,此方法具有对设备要求低,操作简单,制作周期短等优点。该方法制备出的载体是一种同时具有主动靶向、体内长循环、毒副作用低以及在胞内外药物快速释放的新一代智能纳米胶束。
本发明授权双重酶响应纳米胶束的制备在权利要求书中公布了:1.一种双重酶响应的抗癌纳米胶束的制备方法,包括以下步骤: 步骤1、TPGS3350-GPLGVR的制备 1称取1mmolTPGS3350-COOH、1.2mmolN-羟基琥珀酰亚胺NHS和1.2mmolN,N-二环己基碳二亚胺DCC溶于5mLN,N-二甲基甲酰胺DMF,置于圆底烧瓶中,室温下通入氮气磁力搅拌反应4~6h;然后用0.45μm有机滤膜进行过滤,得到TPGS3350-NHS; 2将步骤1中得到的1mmolTPGS3350-NHS和多肽1.2mmolGPLGVR溶于一定量无水DMF中,室温下磁力搅拌反应24h; 3将步骤2中的溶液用0.45μm有机滤膜进行过滤,将滤液转移到透析袋MWCO3500中,以DMF为透析液透析24h,再以蒸馏水为透析液透析48h,每隔4h换一次水; 4将步骤3中透析袋里的滤液转移至培养皿中,使用保鲜膜封口,并用注射器扎好小孔,放入冰箱冷冻后,再放入冷冻干燥机中得到干燥纯净的白色固体TPGS3350-GPLGVR; 步骤2、TPGS3350-GPLGVR-DOX的制备 1称取1mmolTPGS3350-GPLGVR、1.2mmolNHS、1.2mmolDCC溶于5mLDMF中,置于圆底烧瓶中,室温下通入氮气磁力搅拌反应4~6h; 2将步骤1中的溶液用0.45μm有机滤膜过滤,除去副产物N,N-二环己基腺DCU; 3称取1.2mmol盐酸阿霉素、6mmolTEA摩尔比为1:5溶于一定量的DMF中,然后加入到步骤2的滤液中,先在50℃环境下避光搅拌反应4~6h,再磁力搅拌反应过夜; 4将步骤3中的溶液用0.45μm有机滤膜进行过滤,将滤液转移到透析袋中MWCO3500,以DMF为透析液透析24h,再以蒸馏水为透析液透析48h,每隔4h换一次水; 5将步骤4中透析袋里的滤液转移至培养皿中,使用保鲜膜封口,并用注射器扎好小孔,放入冰箱冷冻后,再放入冷冻干燥机中得到最终的产物TPGS3350-GPLGVR-DOX; 步骤3、FA-DEVD的制备 1叶酸活化:称取1mmol叶酸、1.2mmolNHS、1.2mmolDCC,溶于10mL二甲基亚砜DMSO,置于圆底烧瓶中,50℃下避光反应6h; 2将步骤1中的溶液用0.45μm有机滤膜进行过滤,除去反应后的副产物DCU;向滤液中加入用DMSO溶解好的多肽DEVD,摩尔比为1:1.2,在室温下避光搅拌反应48h; 3将步骤2中的溶液用0.45μm有机滤膜进行过滤,将滤液转移到透析袋MWCO500中,以DMSO为透析液透析24h,再以蒸馏水为透析液透析24h,每隔4h换一次水; 4将步骤3中透析袋里的滤液转移至培养皿中,使用保鲜膜封口,并用注射器扎好小孔,放入冰箱冷冻后,再放入冷冻干燥机中得到产物黄色粉末FA-DEVD; 步骤4、FA-DEVD-DOX的制备 1称取1mmolFA-DEVD、1.2mmolNHS、1.2mmolDCC溶于5mLDMSO,置于圆底烧瓶中,室温下搅拌反应12h; 2将步骤1中的溶液用0.45μm有机滤膜进行过滤,除去副产物DCU; 3称取1.5mmol盐酸阿霉素、7.5mmolTEA,摩尔比为1:5溶于一定量的DMSO中,然后加入到步骤2的滤液中室温下避光搅拌反应24h; 4将步骤3中的溶液用0.45μm有机滤膜进行过滤,将滤液转移到透析袋MWCO1000中,以DMSO为透析液透析24h,再以蒸馏水为透析液透析24h,每隔4h换一次水; 5将步骤4中透析袋里的滤液转移至培养皿中,使用保鲜膜封口,并用注射器扎好小孔,放入冰箱冷冻后,再放入冷冻干燥机中得到产物红色粉末FA-DEVD-DOX; 步骤5、胶束TPGS3350-GPLGVR-DOXamp;FA-DEVD-DOX的制备 1在避光条件下用天平分别称取10mgTPGS3350-GPLGVR-DOX、2mgFA-DEVD-DOX和1mgDOX,质量比为10:2:1,置于5mL的圆底烧瓶中,加入2~3mL的DMSO,室温下磁力搅拌3h使其充分溶解; 2在25mL的圆底烧瓶中加入4mL的去离子水,再用注射器吸取步骤1中的溶液,缓慢滴加到剧烈搅拌的圆底烧瓶中,室温下磁力搅拌1~2h; 3将步骤2中的溶液用0.45μm无机滤膜进行过滤,将滤液转移到透析袋MWCO5000中,以去离子水为透析液透析48h,每隔4h换一次水;透析结束后冷冻干燥得到载DOX的TPGS3350-GPLGVR-DOXamp;FA-DEVD-DOX纳米胶束。
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