上海交通大学云南(大理)研究院;上海交通大学王鲁梅获国家专利权
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龙图腾网获悉上海交通大学云南(大理)研究院;上海交通大学申请的专利一种基于Fe-N-C SACs和适配体的新型便捷比色的啶虫脒生物检测方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116625962B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-12-09发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310587810.0,技术领域涉及:G01N21/31;该发明授权一种基于Fe-N-C SACs和适配体的新型便捷比色的啶虫脒生物检测方法是由王鲁梅;俞红;王晨;熊辛和;沈国清;邓云;戴碧涛;王丹凤;耿雪青;王洋;冯郅杰;罗昊;朱将雄设计研发完成,并于2023-05-23向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种基于Fe-N-C SACs和适配体的新型便捷比色的啶虫脒生物检测方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种基于铁单原子纳米酶Fe‑N‑CSACs和适配体的新型便捷比色生物检测方法。并且,以啶虫脒ACE作为检测对象,建立了简单、快速的定量检测ACE的方法。利用双约束路径合成Fe‑N‑CSACs,该材料具有高效的类氧化酶活性。采用Fe‑N‑CSACs‑TMB作为显色传感平台,修饰了巯基基团的ACE适配体作为特异性识别元件,借助SH‑APT适配体一方面能双重抑制Fe‑N‑CSACs‑TMB互作,另一方面能高特异性识别ACE来构建一种新型便捷的比色生物检测ACE的技术,通过对反应体系颜色的直接观察以及吸光度检测实现对ACE的定性及定量检测。
本发明授权一种基于Fe-N-C SACs和适配体的新型便捷比色的啶虫脒生物检测方法在权利要求书中公布了:1.一种基于Fe‑N‑C SACs和适配体的便捷比色的啶虫脒生物检测方法,其特征在于,包括以下步骤进行: S1、铁单原子纳米酶Fe‑N‑C SACs的合成: 将氯化亚铁和1,10‑邻菲罗啉溶解在有机溶剂中,后加入多孔碳超声震荡,高温搅拌至有机溶剂挥发,烘干;加入三聚氰胺研磨,煅烧后得铁单原子纳米酶Fe‑N‑C SACs; S2、啶虫脒适配体铁单原子纳米酶反应体系的构建: 先将不同浓度的标准啶虫脒溶液与巯基修饰的适配体母液混合孵育,然后加入铁单原子纳米酶Fe‑N‑C SACs溶液反应,制得ACE aptamerFe‑N‑C SACs反应体系; 或,将巯基修饰的适配体母液与铁单原子纳米酶Fe‑N‑C SACs溶液混合反应,再加入不同浓度的标准啶虫脒溶液进行孵育,制得ACE aptamerFe‑N‑C SACs反应体系; S3、啶虫脒的标准曲线绘制: 在步骤S2所得反应体系中加入TMB 溶液,再调节pH,反应后记录UV‑Vis吸光度,根据吸光度、不同浓度的标准啶虫脒溶液线性拟出标准曲线; S4、啶虫脒浓度的测定: S4‑1、按照步骤S2的方法构建反应体系取待测浓度的啶虫脒溶液与巯基修饰的适配体混合孵育,然后加入铁单原子纳米酶Fe‑N‑C SACs溶液反应; 或,将巯基修饰的适配体与铁单原子纳米酶Fe‑N‑C SACs溶液混合反应,再加待测浓度的标准啶虫脒溶液进行孵育; S4‑2、按照步骤S3的方法测试浓度在所得反应体系中加入TMB 溶液,再调节pH,反应后用TMB终止显色液终止反应,并记录UV‑Vis吸光度; 将测得的吸光度代入步骤S3所得标准曲线中,即测得啶虫脒溶液的浓度; 步骤S2中,巯基修饰的适配体是通过在适配体5’末端核苷酸上化学修饰巯基得到,所述适配体序列为:5′‑CTGACACCATATTATGAAGA‑3′; 制备出来Fe‑N‑C SACs类氧化物纳米酶含有较好的氧化物酶作用,能催化分解支持液中的氧气产生活性氧,活性氧进一步催化TMB变色,由于巯基修饰的适配体通过分子间作用力覆盖在Fe‑N‑C SACs类氧化物纳米酶的活性位点上,借助巯基修饰的适配体可以双重抑制Fe‑N‑C SACs类氧化物纳米酶的活性,在生物传感界面中加入农药啶虫脒ACE后,ACE能够与ACE适配体特异性结合,从而释放Fe‑N‑C SACs的活性位点,从而催化分解氧气产生活性物质催化TMB变色。
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