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龙图腾网获悉西南林业大学申请的专利石斛兰柱头花粉萌发的荧光染色方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119534078B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-25发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202411837812.1，技术领域涉及：G01N1/28；该发明授权石斛兰柱头花粉萌发的荧光染色方法是由李宗艳;伍倩;明珠;王明蓉设计研发完成，并于2024-12-13向国家知识产权局提交的专利申请。

本石斛兰柱头花粉萌发的荧光染色方法在说明书摘要公布了：本发明涉及植物生物技术领域，具体涉及一种石斛兰柱头花粉萌发的荧光染色方法，包括五个步骤：采集带有柱头的石斛兰花朵，去除萼片等多余部位仅保留柱头，并将柱头两侧修剪成水平状，将其放入预冷的固定液中固定，然后用成梯酒精进行脱水处理；将脱水后的柱头用手术刀沿柱头的中线切开；将切开后的样本置于软化剂中处理使其组织软化；将透明后的样本转移至含有荧光染料的染色液中，在黑暗条件下染色；染色完成后，将样本取出，将其固定在载玻片上，盖上盖玻片，在荧光显微镜下，观察石斛兰柱头花粉的萌发情况。通过该方法能够清晰、准确地观察石斛兰柱头花粉的萌发情况，为石斛兰以及较大型柱头的植物材料的相关研究提供有力技术支持。

本发明授权石斛兰柱头花粉萌发的荧光染色方法在权利要求书中公布了：1.一种石斛兰柱头花粉萌发的荧光染色方法，其特征在于：包括如下步骤： 步骤一：样本采集与固定，具体是： 采集带有柱头的石斛兰花朵，去除萼片等多余部位仅保留柱头，并将柱头两侧修剪成水平状， 将其放入预冷的固定液中固定，然后用梯度酒精进行脱水处理； 步骤二：切割，具体是：将脱水后的柱头用手术刀沿柱头的中线切开； 步骤三：软化处理切割，具体是：将切开后的样本置于软化剂中处理使其组织软化； 步骤四：荧光染色，具体是：将透明后的样本转移至含有荧光染料的染色液中，在黑暗条件下染色； 步骤五：制片与观察，具体是： 染色完成后，将样本取出，将其固定在载玻片上，盖上盖玻片，在荧光显微镜下，观察石斛兰柱头花粉的萌发情况，并进行图像采集和分析； 所述的软化剂为4molLNaOH溶液，软化在40摄氏度下进行，处理时间为2-3小时； 所述的荧光染料选用水溶性苯胺蓝，染色液浓度为0.1%； 染色前将软化后的样本用无菌水清洗三次，放入0.1N磷酸缓冲液中处理，处理时间为10分钟； 所述的石斛兰为鼓槌石斛时，选取的柱头直径为5-6mm；所述的石斛兰为铁皮石斛时，选取的柱头直径为1-3mm。

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