康珠森科组培实验室(贵州)有限公司;贵州省林业学校;贵州省国有扎佐林场(贵州景阳森林公园)田怀获国家专利权
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龙图腾网获悉康珠森科组培实验室(贵州)有限公司;贵州省林业学校;贵州省国有扎佐林场(贵州景阳森林公园)申请的专利一种半枫荷的组织培养方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119256986B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-25发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411689803.2,技术领域涉及:A01H4/00;该发明授权一种半枫荷的组织培养方法是由田怀;陈明德;周信好;田荣设计研发完成,并于2024-11-25向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种半枫荷的组织培养方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种半枫荷的组织培养方法,属于半枫荷组培技术领域,所述方法包括外植体采集与处理、外植体消毒、诱导培养、增殖‑生根一体化培养、炼苗与移栽等步骤,通过对培养基进行改进,实现半枫荷的增殖‑生根一体化培养,缩短组培时间、减少操作成本;并促进半枫荷组培苗干物质积累,配合对激素水平、光照时间和强度、温度等进行把控,有效抑制玻璃化现象的发生,进而解决半枫荷组培过程中组培苗玻璃化导致繁殖系数降低的问题,实现对半枫荷的高效组培,对促进半枫荷产业的发展具有重要意义。
本发明授权一种半枫荷的组织培养方法在权利要求书中公布了:1.一种半枫荷的组织培养方法,其特征在于,所述方法如下: 1外植体采集与处理:采集母树上枝条,剪取木质化茎段并去除叶片,清洗后得到外植体; 2外植体消毒:将外植体剪成带1~2个腋芽、长2~3cm的茎段,无菌水清洗后依次放入乙醇溶液和升汞溶液中消毒得到消毒后外植体; 3诱导培养:将消毒后外植体接种至诱导培养基中进行诱导培养得到不定芽; 4增殖-生根一体化培养:将诱导培养得到的不定芽剪取单芽,然后接种至增殖-生根一体培养基中进行增殖-生根一体化培养得到生根苗; 5炼苗与移栽:对生根苗进行炼苗,炼苗完成后将生根苗从组培瓶中取出,洗去根部培养基后用多菌灵溶液浸泡20min,即可移栽至基质盘中; 所述步骤3中诱导培养基组分为:MS+1.0~1.2mgL6-BA+0.2~0.5mgLNAA+30gL蔗糖+6.8gL琼脂,pH=5.8; 所述步骤4中增殖-生根一体培养基为固液双层培养基,其中上层为液体增殖培养基,下层为固体生根培养基,所述增殖-生根一体培养基包括以下原料: 上层液体增殖培养基:MS+0.2-0.3mgL6-BA+0.05~0.15mgLNAA+30gL蔗糖+2~3gL环己胺+2~3gL醋酸异丙酯+3-4gL聚乙二醇+8~15gL稳定剂,pH=5.8; 下层固体生根培养基:MS+0.6~0.8mgLIBA+0.4mgLNAA+0.6mgLABT+30gL蔗糖+6.8gL琼脂,pH=5.8; 所述稳定剂包括以下原料: 海藻酸钠、6-BA、NAA、2wt%氯化钙溶液、米糠蜡、三乙胺、硫脲、2,4,6-三二甲胺基甲基苯酚、环氧树脂; 所述稳定剂制备方法如下: A:将海藻酸钠加水溶解制成5wt%海藻酸钠溶液后加入6-BA、NAA混合均匀,然后缓慢滴入2wt%氯化钙溶液中胶凝得到海藻酸钠包覆球,无菌水清洗3遍后于45℃下干燥20-30min得到半干燥海藻酸钠包覆球,待用; B:将米糠蜡研磨过300目筛得到米糠蜡微粒;将三乙胺、硫脲、2,4,6-三二甲胺基甲基苯酚放入反应釜中混合均匀,升温至110~130℃反应0.5~1h,然后冷却至55℃后加入环氧树脂充分混合均匀后再加入米糠蜡微粒混合均匀得到包覆液; C:将包覆液喷涂至半干燥海藻酸钠包覆球表面,于阴凉通风处静置12~24h,然后于60~70℃温度下放置2~3h使包覆球表面米糠蜡微粒熔融流出,再用去离子水清洗3~5遍得到稳定剂; 所述步骤A中海藻酸钠溶液、6-BA、NAA的质量比为160-300:0.03-0.05:0.01-0.02; 所述步骤B中三乙胺、硫脲、2,4,6-三二甲胺基甲基苯酚、环氧树脂、米糠蜡微粒的质量比为8~16:10~20:10~20:50~70:10~20。
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