湖北大学马立新获国家专利权
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龙图腾网获悉湖北大学申请的专利一种构象信号肽介导异源蛋白在大肠杆菌中分泌表达的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN118773227B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-25发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202410806190.X,技术领域涉及:C12N15/70;该发明授权一种构象信号肽介导异源蛋白在大肠杆菌中分泌表达的方法是由马立新;赵帅;王飞;余芳;李文强;陈晚苹设计研发完成,并于2024-06-21向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种构象信号肽介导异源蛋白在大肠杆菌中分泌表达的方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种构象信号肽介导异源蛋白在大肠杆菌中分泌表达的方法,具体为:将至少两个异源蛋白同时融合至构象信号肽如sfGFP上并构建异源重组蛋白表达载体,其中构象信号肽具有β‑桶状结构,且融合位点为构象信号肽的氨基端、羧基端以及多个Loop环中的至少两个;再将异源重组蛋白表达载体转化至大肠杆菌,对所得基因工程菌株进行培养表达。本发明方法无需通过经典信号肽介导,即可实现异源蛋白在大肠杆菌中胞外分泌表达,且sfGFP作为融合标签对目的蛋白功能无影响,能够快速表达纯化到相应的目的蛋白;本发明拓展了蛋白分泌表达的途径,可实现多种异源蛋白的同时表达,还可有效提高目的蛋白的表达量。
本发明授权一种构象信号肽介导异源蛋白在大肠杆菌中分泌表达的方法在权利要求书中公布了:1.一种构象信号肽介导异源蛋白在大肠杆菌中分泌表达的方法,其特征在于,所述构象信号肽为超折叠绿色荧光蛋白,所述方法包括以下步骤: S1、将至少两个同种或不同种的异源蛋白同时融合至构象信号肽上并构建异源重组蛋白表达载体,所述构象信号肽具有β-桶状结构,所述融合的位点为构象信号肽的氨基端、羧基端以及多个Loop环中的至少两个;其中,超折叠绿色荧光蛋白的Loop环选自序列如SEQIDNO.1所示的Loop1、序列如SEQIDNO.2所示的Loop2以及序列如SEQIDNO.3所示的Loop3; S2、将异源重组蛋白表达载体转化至大肠杆菌,对所得基因工程菌株进行培养表达,获得融合蛋白; 所述异源蛋白为纳米抗体Fu2和纳米抗体ANTE,所述纳米抗体Fu2和ANTE分别融合在超折叠绿色荧光蛋白氨基端和羧基端,且所得融合蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.7所示;或者, 所述异源蛋白为monellin,其融合在超折叠绿色荧光蛋白的Loop环上且所得融合蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.12所示。
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