华中农业大学曹小娟获国家专利权
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龙图腾网获悉华中农业大学申请的专利一种通过敲除rnf212b基因创制多倍体鱼的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120738293B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-18发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202511258160.0,技术领域涉及:C12N15/89;该发明授权一种通过敲除rnf212b基因创制多倍体鱼的方法是由曹小娟;梅熠辉;高坚;孙兵;张运邦设计研发完成,并于2025-09-04向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种通过敲除rnf212b基因创制多倍体鱼的方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种通过敲除rnf212b基因创制多倍体鱼的方法,属于动物遗传育种领域。利用CRISPRCas9系统对斑马鱼的rnf212b基因进行编辑,通过基因型鉴定和选育获得rnf212b纯合敲除个体,利用rnf212b纯合敲除二倍体雌性能够产生不减数卵子的特性,可获得100%遗传可控的三倍体后代。本发明为人工创制多倍体鱼提供了更多的基因编辑靶点,有利于提高基因编辑效率,加快水产养殖业的可持续发展。
本发明授权一种通过敲除rnf212b基因创制多倍体鱼的方法在权利要求书中公布了:1.一种通过敲除rnf212b基因创制多倍体斑马鱼的方法,其特征在于包括以下步骤: 1利用CRISPRCas9系统对野生型二倍体鱼的rnf212b基因进行编辑,通过基因分型鉴定获得二倍体鱼的F0代基因敲除突变体; 2将F0代基因敲除突变体与野生型二倍体鱼杂交,待性成熟时,通过基因分型鉴定获得F1代基因敲除杂合突变体rnf212b+-; 3将性成熟的F1代基因敲除杂合突变体rnf212b+-自交,待性成熟时,通过基因分型鉴定获得F2代基因敲除纯合突变体rnf212b--; 4将雌性F2代基因敲除纯合突变体rnf212b--与雄性二倍体野生型杂交,待性成熟时,通过基因分型鉴定和倍性分析,确认该性成熟子代均为基因敲除杂合突变三倍体rnf212b+--,该三倍体的存活子代仅有雄性个体且雄性不育, 所述CRISPRCas9系统中,gRNA的上游引物序列如SEQIDNO:3所示,下游引物序列如SEQIDNO:4所示。
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