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龙图腾网获悉青岛赛珥生物医学科技有限公司申请的专利一种诱导脂肪干细胞分化为多巴胺能神经元的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN111690605B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-14发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202010697291.X，技术领域涉及：C12N5/0775；该发明授权一种诱导脂肪干细胞分化为多巴胺能神经元的方法是由徐子卓;宫岩;陈坤;王卓凡;姜辉设计研发完成，并于2020-07-20向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种诱导脂肪干细胞分化为多巴胺能神经元的方法在说明书摘要公布了：本发明公开一种诱导脂肪干细胞分化为多巴胺能神经元的方法，属于生物医疗技术领域，通过对脂肪干细胞的分离、脂肪干细胞的传代培养、诱导培养转化得到多巴胺能神经元，实现了利用自体来源的脂肪组织分离培养得到大量脂肪干细胞，通过使用两种特定培养基将脂肪干细胞转化为多巴胺能神经元，能够安全、有效的获得批量稳定的多巴胺能神经元，具有较高的分化率，通过免疫荧光及细胞计数实验表明，多巴胺能神经元转化率为90.4±0.76，生存率为98.9±0.55，使用多巴胺ELISA试剂盒检测转化后的多巴胺能神经元分泌多巴胺的数量平均为450pgml，因此，证实本发明所提供的脂肪干细胞提取及转化步骤具有温和、稳定的特点，提取的细胞适用于大批量应用。

本发明授权一种诱导脂肪干细胞分化为多巴胺能神经元的方法在权利要求书中公布了：1.一种诱导脂肪干细胞分化为多巴胺能神经元的方法，其特征在于，所述方法包括： 采用抽脂术获取自体脂肪组织样品，并在无菌条件下至多冰封保存6小时内用于脂肪干细胞的分离培养； 采用氯化钠生理盐水对自体脂肪组织样品进行冲洗，广泛冲洗4～6遍以便充分去除样品中含有的脂肪碎片、油脂、血细胞和局部麻醉剂； 采用25ml的移液管经冲洗完毕的自体脂肪组织样品移入新的50ml无菌离心管中，之后采用等体积的脂肪消化酶消化脂肪组织，振荡混匀后在37℃的恒温摇床中振荡25分钟，振荡过程中保持230rmin的均匀转速旋转，并且振荡过程中每间隔5分钟用手自上向下混匀一次； 振荡完毕以后，放置在离心机上进行离心分离，其中，离心分离过程中保持离心机的温度在28℃，离心机的转速为250rmin，离心分离的时间不小于5分钟； 之后丢掉顶层液体，采用生理盐水重悬自体脂肪组织样本后采用100μm分子筛进行筛选之后，再次采用离心机进行离心分离，离心分离过程中仍保持离心机的温度在28℃，离心机的转速为250rmin，离心分离的时间不小于10分钟； 之后再次采用生理盐水重悬自体脂肪组织样本并进行冲洗之后，采用250rmin的离心机再次进行离心分离10分钟之后，加入脂肪干细胞培养液并调整细胞浓度至1.5x105～2.5x105cm2，培养48小时以使细胞融合度达到85％～90％之间； 当细胞融合度达到85％～90％之间后，采用吸管吸出培养瓶内的培养基，加入PBS生理盐水洗涤细胞一次，之后加入1～2ml胰蛋白酶替代物消化2～3分钟，在显微镜下观察到细胞变圆后加入4ml培养基终止消化，之后轻轻吹吸若干次以使培养细胞从培养瓶的底部脱落； 将脱落形成的细胞悬液吸入15ml离心管中，采用280rmin的离心机进行离心分离10分钟后，舍弃上次清液，并加入2ml培养基进行吹吸混匀，吹吸混匀后平均分配到3个新的培养瓶中； 在新的培养瓶中补加适量培养基之后轻轻晃动培养瓶，待细胞均匀分布之后放入37℃的5％二氧化碳培养箱中进行培养以使脂肪干细胞发生传代； 将发生传代反应到第三至第五代的脂肪干细胞放置在明胶包被的6孔培养板中进行诱导分化培养，培养密度为20000个孔，培养一天之后采用生理盐水进行清洗一遍； 清洗完毕之后将生长培养基替换为含有低糖DMEM、1％FBS、0.6％B27、250ngmlSHH、100ngmlFGF8、50ngmlbFGF和100gmlL-谷氨酰胺的诱导培养基继续进行诱导分化培养； 诱导分化培养至第八天时，采用生理盐水进行清洗之后将生长培养基替换为DMEM低糖、50ngmlBDNF、100gmlL-谷氨酰胺的转化培养基，并将细胞温育培养4天，诱导分化后得到多巴胺能神经元。

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