江西师范大学谢运昌获国家专利权
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龙图腾网获悉江西师范大学申请的专利一种放线菌用基因表达载体pJXNU及其构建方法和应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115927431B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-11-04发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202210869300.8,技术领域涉及:C12N15/76;该发明授权一种放线菌用基因表达载体pJXNU及其构建方法和应用是由谢运昌;张志斌;陈奇;杜思瑶;朱笃;黄运红;袁涛;倪海燕;黎金祖;刘文慧设计研发完成,并于2022-07-22向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种放线菌用基因表达载体pJXNU及其构建方法和应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种放线菌用基因表达载体pJXNU及其构建方法和应用。该载体的序列如SEQIDNO.2所示,是在pSET152质粒基础上,加载了kanamycin和thiostrepton抗生素抗性基因,以及533bp如SEQIDNO.1所示的含3个基因表达元件序列和2套多克隆位点multiplecloningsiteMCS的DNA片段。该载体有2个自主表达的强效基因表达元件和1个thiostrepton诱导表达元件,可在一个载体上实现2个或2组基因的自主高效表达和或1个或1组基因的诱导表达,可在放线菌宿主内实现多类型的功能基因研究与应用。
本发明授权一种放线菌用基因表达载体pJXNU及其构建方法和应用在权利要求书中公布了:1.一种放线菌用基因表达载体pJXNU的构建方法,其特征在于,包括以下步骤: 1使用NheI处理pSET152质粒,获得线性化的质粒片段pSET152-NheI; 2以SuperCosI质粒为模板,扩增KanR片段,利用同源重组方法,将KanR克隆至pSET152-NheI,获得目标质粒pSET152K; 3使用NheI处理pSET152K,获得线性化的片段pSET152K-NheI; 4以pIJ6021质粒为模板,扩增ThioR片段,利用同源重组方法,将ThioR克隆至pSET152-NheI,获得目标质粒pSET152KT; 5合成如SEQIDNO.1所示的基因表达元件序列,利用EcoRV和XbaI的组合分别处理基因表达元件及pSET152KT质粒,将酶切后的片段连接,得到目标载体pJXNU。
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