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龙图腾网获悉江南大学;鄂尔多斯市中轩生化股份有限公司申请的专利一种生产D-柠檬烯的重组酵母菌株及其构建方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115710557B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-10-31发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202210820746.1，技术领域涉及：C12N1/19；该发明授权一种生产D-柠檬烯的重组酵母菌株及其构建方法是由刘龙;孙正艳;陈坚;崔佳;吕雪芹;堵国成;方杰;李江华;董金儒;刘延峰;孔晓设计研发完成，并于2022-07-13向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种生产D-柠檬烯的重组酵母菌株及其构建方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种生产D‑柠檬烯的重组酵母菌株及其构建方法，本发明在前期构建的菌株MKL8的基础上继续优化前体乙酰辅酶A和NADPH辅因子水平，为胞内柠檬烯合成创造了较优条件，并增加胞内柠檬烯合酶拷贝数由2个至8个，摇瓶发酵实现产量由原来的657mgL，提升至1248mgL，比原产量提高1.90倍。再运用区室化工程将柠檬烯合成全途径酶定位至线粒体，实现重组酿酒酵母菌株柠檬烯在线粒体内的同步高效合成。综合运用细胞质与线粒体双重调控使柠檬烯的产量得到进一步的提升至1392mgL，最终实现柠檬烯在酿酒酵母中的高效合成，重组酵母菌株相对于原菌株具有较好的生长速率，具有较大的应用推广价值。

本发明授权一种生产D-柠檬烯的重组酵母菌株及其构建方法在权利要求书中公布了：1.一种生产D-柠檬烯的重组酵母菌株，其特征在于，所述的菌株以酿酒酵母MKL8为宿主，敲除了柠檬酸合酶基因CIT2和谷氨酸脱氢酶基因GDH1，并增加了柠檬烯合酶tLimS拷贝数，所述的柠檬烯合酶tLimS的拷贝数由2增加至6，增加的柠檬烯合酶tLimS的表达位点为酿酒酵母基因组的1021b位点、208a位点、308a位点和720a位点； 所述的重组酵母菌株还包括将柠檬烯合成途径酶的N-末端融合线粒体定位信号MLS，使所述柠檬烯合成途径酶定位至线粒体表达，所述的柠檬烯合成途径酶包括甲羟戊酸焦磷酸脱羧酶基因IDI、截短的3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶基因tHMG1、乙酰乙酰辅酶A硫解酶基因ERG10、β-羟-β-甲戊二酸单酰辅酶a合酶基因ERG13、甲羟戊酸激酶基因ERG12、磷酸甲羟戊酸ERG8和焦磷酸甲羟戊酸脱羧酶ERG19、法尼基焦磷酸合酶突变体基因ERG20ww和柠檬烯合酶基因tLimS。

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