北京大学赵美萍获国家专利权
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龙图腾网获悉北京大学申请的专利基因组DNA序列中缺碱基位点的均相荧光定量检测方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115820808B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-10-24发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202111093267.6,技术领域涉及:C12Q1/682;该发明授权基因组DNA序列中缺碱基位点的均相荧光定量检测方法是由赵美萍;谭灏诚;王嘉禹;师明赫设计研发完成,并于2021-09-17向国家知识产权局提交的专利申请。
本基因组DNA序列中缺碱基位点的均相荧光定量检测方法在说明书摘要公布了:本发明公开了基因组DNA序列中缺碱基位点的均相荧光定量检测方法,通过共价连接反应将已知序列寡核苷酸链共价标记到缺碱基位点,利用Lambda核酸外切酶及对应荧光探针实现对基因组DNA序列中缺碱基位点的定量检测。本发明操作简便,灵敏度高,所需生物样品量小,能够方便、快速、灵敏、准确地测定生物样品中缺碱基位点的含量,在与DNA损伤和修复相关的生物医学研究、临床诊断和药物开发评价等方面都具有较高的应用价值。
本发明授权基因组DNA序列中缺碱基位点的均相荧光定量检测方法在权利要求书中公布了:1.一种非疾病诊断目的的基因组DNA序列中缺碱基位点的定量检测方法,包括以下步骤: 1制备5’末端为羟胺修饰的寡脱氧核苷酸链即X链,所述X链的长度为14~16nt; 2通过T4PDG处理将基因组DNA序列的缺碱基位点酶解为5’末端暴露醛基结构,然后加入X链进行共价标记反应; 3在共价标记反应结束后,加入辅助链Y链和未与缺碱基位点反应的多余X链杂交,所述Y链与游离的X链杂交形成X链5’末端的2个核苷酸错配打开、其余部分匹配的双链DNA结构,利用Lambda核酸外切酶将多余X链水解除去,然后加热使Lambda核酸外切酶失活; 4在步骤3除去多余X链的反应产物溶液中加入P链杂交,所述P链为两端分别标记有荧光基团和猝灭基团的寡核苷酸探针,与共价标记在缺碱基位点上的X链杂交形成P链5’末端的2个核苷酸错配打开、其余部分匹配的双链DNA结构,然后加入Lambda核酸外切酶,P链被快速水解发出荧光信号,实时采集荧光信号; 5通过检测反应溶液荧光信号上升的速率对样品中缺碱基位点的含量进行准确定量。
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