中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)田进获国家专利权
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龙图腾网获悉中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)申请的专利一种猪轮状病毒反向遗传系统及其应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120464587B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-10-17发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510977065.X,技术领域涉及:C12N7/01;该发明授权一种猪轮状病毒反向遗传系统及其应用是由田进;冯力;潘玉迪设计研发完成,并于2025-07-16向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种猪轮状病毒反向遗传系统及其应用在说明书摘要公布了:本发明属于生物医药技术领域,具体涉及一种轮状病毒反向遗传系统的构建及其在拯救NMTL猪轮状病毒株中的应用。本发明发现针对不同基因型的轮状病毒的拯救工作,其利用的反向遗传操作系统会有显著不同。针对本发明的G9P[23]基因型猪轮状病毒株,将猪轮状病毒的11基因片段重组到pOK‑T7载体上获得10个猪轮状病毒感染性重组质粒,其中,本发明将编码病毒NSP2和NSP5的基因放到一个质粒中,得到pOK‑T7‑NSP25质粒,最终形成基于10个猪轮状病毒感染性重组质粒的反向遗传系统。应用该系统能够成功拯救了G9P[23]基因型猪轮状病毒NMTL株,得到rNMTL猪轮状重组病毒株。
本发明授权一种猪轮状病毒反向遗传系统及其应用在权利要求书中公布了:1.一种猪轮状病毒重组毒株,所述猪轮状病毒重组毒株是通过如下方法获得的,具体包括如下步骤: 第一步,反向转录载体的构建:通过同源重组方法在pOK12载体上插入T7启动子、HdRZ核酶编码基因和T7终止子得到反向转录载体pOK-T7; 第二步,构建猪轮状病毒株感染性重组质粒:将猪轮状病毒ApigChinaNMTL2008G9P[23]毒株的11个基因片段重组到第一步获得的pOK-T7载体上,所述基因片段为VP1、VP2、VP3、VP4、VP6、VP7、NSP1、NSP2、NSP3、NSP4和NSP5,构建得到10个猪轮状病毒株感染性重组质粒,包括pOK-T7-VP1、pOK-T7-VP2、pOK-T7-VP3、pOK-T7-VP4、pOK-T7-VP6、pOK-T7-VP7、pOK-T7-NSP1、pOK-T7-NSP3、pOK-T7-NSP4和pOK-T7-NSP25,其中所述pOK-T7-NSP25重组质粒中的NSP2与NSP5基因通过Linker连接; 第三步,将第二步中构建的猪轮状病毒株感染性重组质粒和辅助质粒共转染至宿主细胞中表达,得到猪轮状重组病毒。
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