河南中医药大学张靖柯获国家专利权
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龙图腾网获悉河南中医药大学申请的专利从箭叶淫羊藿中提取异戊烯基黄酮化合物的制备方法及应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119264093B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-10-17发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411379655.4,技术领域涉及:C07D311/58;该发明授权从箭叶淫羊藿中提取异戊烯基黄酮化合物的制备方法及应用是由张靖柯;解双双;喻翔;郑晓珂;冯卫生设计研发完成,并于2024-09-30向国家知识产权局提交的专利申请。
本从箭叶淫羊藿中提取异戊烯基黄酮化合物的制备方法及应用在说明书摘要公布了:从箭叶淫羊藿中提取的异戊烯基黄酮化合物及其制备方法与应用,其制备方法是:将箭叶淫羊藿粉碎制膏,用水混悬,分别用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取,得各部位浸膏,用硅胶柱层析法进行梯度洗脱分离,根据薄层色谱TLC显色结果将相似部分合并,得到多个极性段;将目标极性段层析,梯度洗脱,得多个组分,然后通过薄层色谱TLC点板吸收相似组分合并,得多个分组分;将目标分组分洗脱纯化,收集不同保留时间的流分,干燥,分别得2个化合物,对人乳腺癌细胞MCF‑7的细胞活力有显著的抑制作用,具有抗乳腺癌活性,实现在制备治疗乳腺癌药物中的应用,社会和经济效益巨大。
本发明授权从箭叶淫羊藿中提取异戊烯基黄酮化合物的制备方法及应用在权利要求书中公布了:1.从箭叶淫羊藿中提取的异戊烯基黄酮化合物2''S,2'''S-epimesatineO1a和2''R,2'''R-epimesatineO1b,分子结构式为: ; 其制备方法是: 1制备极性段 将干燥的箭叶淫羊藿地上部分80kg粉碎,每次用120L体积浓度为70%的乙醇,于45℃下回流提取三次,每次30min,减压回收溶剂,得浸膏6.5kg,将浸膏用3倍体积的蒸馏水混悬,得混悬液,混悬液依次在室温下分别用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取4次,每次15L,萃取2h,分别得石油醚部位浸膏、二氯甲烷部位浸膏、乙酸乙酯部位浸膏和正丁醇部位浸膏,对二氯甲烷部位浸膏2.1kg,采用100–200目正相硅胶柱层析法进行梯度洗脱分离,梯度体积比为石油醚–乙酸乙酯=50︰1,用量12L;40︰1,用量20L;35︰1,用量20L;20︰1,用量40L;10︰1,用量40L;5︰1,用量40L;1︰1,用量20L;0︰1,用量4L,根据薄层色谱显色结果将相似部分合并,得到8个极性段Fr.A……Fr.G、Fr.H; 2制备第一分组分 将极性段Fr.G100.0g用100–200目的正相硅胶柱层析,以石油醚乙酸乙酯为洗脱剂,进行梯度洗脱,洗脱梯度为体积比的石油醚乙酸乙酯=50:1,用量1L,35︰1,用量5L,20︰1,用量5L,10︰1,用量5L,5︰1,用量5L,1︰1,用量5L,0︰1,用量5L,将洗脱液每1L合并在一起,减压回收溶剂得到多个组分,然后将所有组分通过薄层色谱点板,将薄层板上吸收相似的组分合并,得18个第一分组分Fr.F1……Fr.F17、Fr.F18; 3制备第二分组分 将第一分组分Fr.G1765.0g经200–300目正相硅胶进行梯度洗脱,洗脱液的体积梯度比为石油醚乙酸乙酯=35︰1,用量1L,20︰1,用量4L,10︰1,用量4L,5︰1,用量4L,1︰1,用量2L,0︰1,用量1L,将洗脱液每500mL合并在一起,减压回收得到多个组分,然后将多个组分通过薄层色谱点板,对薄层板上吸收相似的组分合并,得19个第二分组分Fr.G17.1、Fr.G17.2、Fr.G17.3……Fr.G17.15……Fr.G17.19; 4制备第三分组分 将第二分组分Fr.G17.1538.9g经ODS柱色谱梯度洗脱,洗脱液的体积梯度比为甲醇:水=40︰60,用量1L,50︰50,用量2L,60︰40,用量3L,70︰30,用量3L,80︰20,用量3L,90︰10,用量2L,100︰0,用量1L,将洗脱液每500mL合并在一起,减压回收溶剂得到多个组分,然后将多个组分通过薄层色谱点板,对薄层板上吸收相似的组分合并,得到12个第三分组分Fr.G17.15.1、Fr.G17.15.2、Fr.G17.15.3……Fr.G17.15.9、Fr.G17.15.9……Fr.G17.15.12; 5制备第四分组分 将第三分组分Fr.G17.15.10经ODS柱色谱洗脱,洗脱液的体积梯度比为甲醇:水=40︰60,用量2L,50︰50,用量2L,60︰40,用量5L,70︰30,用量5L,80︰20,用量4L,90︰10,用量2L,100︰0,用量1L,将洗脱液每500mL合并在一起,减压回收溶剂得到多个组分,然后将多个组分通过薄层色谱点板,对薄层板上吸收相似的组分合并,得13个第四分组分Fr.G17.15.10.1、Fr.G17.15.10.2、Fr.G17.15.10.3……Fr.G17.15.10.6……G17.15.10.13; 6制备异戊烯基黄酮化合物2''S,2'''S-epimesatineO和2''R,2'''R-epimesatineO 采用10ID×250mm的RPC18液相色谱柱,将第四分组分Fr.G17.15.10.6经半制备HPLC纯化分离,流动相为乙腈:水=60:40,流速为2mLmin,得到7个组分Fr.G17.15.10.6.1、Fr.G17.15.10.6.2…G17.15.10.6.7; 将组分Fr.G17.15.10.6.2再次经HPLC纯化分离,流动相为乙腈:水=35:65,流速为2mLmin,得到6个组分Fr.G17.15.10.6.2.1…Fr.G17.15.10.6.2.4…G17.15.10.6.2.6; 将组分Fr.G17.15.10.6.2.4再次经HPLC纯化分离,流动相为乙腈:水=55:45,流速为2mLmin,得到5个组分Fr.G17.15.10.6.2.4.1…Fr.G17.15.10.6.2.4.4、Fr.G17.15.10.6.2.4.5; 其中,保留时间tR63.6min的组分Fr.G17.15.10.6.2.4.5,干燥,即得化合物2''S,2'''S-epimesatineO11.2mg; 将组分Fr.G17.15.10.6.2.4.4再经HPLC纯化,流动相为乙腈:水=60:40,流速为2mLmin,收集保留时间tR19.3min的流分,干燥,得到2''R,2'''R-epimesatineO9.0mg。
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