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尚纯生物科技(武汉)有限公司彭刚获国家专利权

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龙图腾网获悉尚纯生物科技(武汉)有限公司申请的专利一种原核表达制备重组脱氧核糖核酸酶的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN117448368B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-10-14发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202311456697.9,技术领域涉及:C12N15/70;该发明授权一种原核表达制备重组脱氧核糖核酸酶的方法是由彭刚;聂红艳;蒋烨;石梅香设计研发完成,并于2023-11-03向国家知识产权局提交的专利申请。

一种原核表达制备重组脱氧核糖核酸酶的方法在说明书摘要公布了:本发明属于基因工程技术领域,尤其涉及一种原核表达制备重组脱氧核糖核酸酶的方法。方法包括:S1、将目的基因连接到表达载体的多克隆位点内,构建得到重组表达载体,所述目的基因包括XXA标签编码基因和脱氧核糖核酸酶编码基因;S2、将重组表达载体导入大肠杆菌中;S3、培养重组大肠杆菌并进行诱导表达;S4、将重组大肠杆菌培养液离心后收集菌体,超声破碎,离心收集细胞破碎上清液,之后亲和纯化得到脱氧核糖核酸酶融合蛋白。本发明通过XXA标签与脱氧核糖核酸酶融合,采用原核表达系统,诱导表达过程中宿主菌活性高,且实现了DNase的高效表达并显著提高了可溶性表达水平,具有DNase生物活性好和稳定性高等优点。

本发明授权一种原核表达制备重组脱氧核糖核酸酶的方法在权利要求书中公布了:1.一种原核表达制备重组脱氧核糖核酸酶融合蛋白的方法,其特征在于,包括以下步骤: S1、将目的基因连接到表达载体的多克隆位点内,构建得到重组表达载体,所述目的基因从上游到下游依次包括纯化标签编码基因、XXA标签编码基因和脱氧核糖核酸酶编码基因,所述纯化标签为His标签和Myc标签,所述XXA标签编码基因的核苷酸序列如SEQIDNO.3序列的第91-666位碱基所示,所述脱氧核糖核酸酶编码基因的核苷酸序列如SEQIDNO.3序列的第688-1467位碱基所示,所述脱氧核糖核酸酶的氨基酸序列如下所示: MLKIAAFNIRTFGETKMSNATLASYIVRIVRRYDIVLIQEVRDSHLVAVGKLLDYLNQDDPNTYHYVVSEPLGRNSYKERYLFLFRPNKVSVLDTYQYDDGCSCGNDSFSREPAVVKFSSHSTKVKEFAVALHSAPSDAVAEINSLYDVYLDVQQKWHLNDVMLMGDFNADCSYVTSSQWSSIRLRTSSTFQWLIPDSADTTATSTNCTYDRIVVAGSLLQSSVVPGSAAPFDFQAAYGLSNEMALAISDHYPVEVTLT; S2、将所述重组表达载体导入大肠杆菌中,得到重组大肠杆菌; S3、将重组大肠杆菌接种至添加有卡那霉素的液体LB培养基或TB培养基中,培养至OD600达到0.6-0.7时,加入终浓度为0.1mMIPTG,在37℃诱导表达4-5h,得到重组大肠杆菌培养液; S4、将所述重组大肠杆菌培养液离心后收集菌体,超声破碎所述菌体,离心收集细胞破碎上清液,之后亲和纯化得到重组脱氧核糖核酸酶融合蛋白。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人尚纯生物科技(武汉)有限公司,其通讯地址为:430206 湖北省武汉市东湖新技术开发区神墩四路666号农业种子生产、仓储及销售项目(全部自用)生产研发楼、仓库栋/单元1-屋面层研发楼A区0902号房(自贸区武汉片区);或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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