买专利卖专利找龙图腾，真高效！ 查专利查商标用IPTOP,全免费！专利年费监控用IP管家,真方便！

龙图腾网获悉安徽师范大学申请的专利一种辣椒原生质体的分离及瞬时转化方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115896000B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-10-14发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202211637970.3，技术领域涉及：C12N5/04；该发明授权一种辣椒原生质体的分离及瞬时转化方法是由程伟;朱莉云;储谟立;李园;王楠设计研发完成，并于2022-12-20向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种辣椒原生质体的分离及瞬时转化方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种辣椒原生质体的分离及瞬时转化方法，包括以下步骤：取辣椒植株第5~7片无菌真叶进行酶解，得到含辣椒叶肉细胞原生质体的酶解混合液，将所述酶解混合液过滤，滤液离心后得到原生质体沉淀，重悬后获得辣椒原生质体混悬液，利用PEG介导法进行外源基因的瞬时转化。通过实验证明：利用本发明的分离方法得到的辣椒原生质体的产量高达11.09~11.79×106个gFW，活力高达85.06%~89.09%，通过PEG4000介导转化的方法将外源质粒转化到本发明提取的辣椒原生质体中进行表达，最高瞬时转化效率可达64%。

本发明授权一种辣椒原生质体的分离及瞬时转化方法在权利要求书中公布了：1.一种辣椒原生质体的分离及瞬时转化方法，其特征在于：包括以下步骤： S1：选取籽粒饱满的辣椒成熟种子，在超净工作台中进行消毒，将消毒后的种子在超净工作台上吹干，接种于GM培养基上进行培养，待辣椒植株第7片真叶刚完全展开时，剪取第5~7片无菌真叶作为供试材料； S2：将剪取的无菌真叶去除主脉，切成宽0.5mm的细条，浸没于酶解液中，在23℃、黑暗条件下酶解4h，得到含辣椒叶肉细胞原生质体的酶解混合液；其中，所述酶解液配方为：1.25%纤维素酶R-10，0.3%离析酶R-10，20mMpH=5.7MES缓冲液，0.4M甘露醇，20mMKCl，10mMCaCl2，5mMβ-巯基乙醇，0.1%BSA； S3：将含辣椒叶肉细胞原生质体的酶解混合液过滤，滤液离心后得到原生质体沉淀，重悬后获得辣椒原生质体混悬液； S4：利用PEG介导法进行外源基因的瞬时转化；其中，所述转化体系为：20μg质粒，100μL辣椒原生质体混悬液，110μLPEG溶液；所述转化条件为：将转化体系轻柔混匀后于室温孵育20min；所述PEG溶液的制备方法为：称取3.5gPEG4000，加入2.5ml0.8M甘露醇和1mL1MCaCl2，加超纯水定容至10mL； 步骤S1中，所述GM培养基配方为：2.2gLMS粉末+15gL蔗糖+2.7gL植物凝胶，pH=5.72； 步骤S3中，所述辣椒原生质体混悬液的原生质体密度为2×106个mL； 步骤S4中，所述质粒为pBinGFP2。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术，可联系本专利的申请人或专利权人安徽师范大学，其通讯地址为：241000 安徽省芜湖市北京东路1号；或者联系龙图腾网官方客服，联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

以上内容由龙图腾AI智能生成。