合成DNA技术公司乌沙提·达斯查卡雷维尔提获国家专利权
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龙图腾网获悉合成DNA技术公司申请的专利制备双索引甲基化序列文库的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN114555831B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-10-14发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202080067258.7，技术领域涉及：C12Q1/6869；该发明授权制备双索引甲基化序列文库的方法是由乌沙提·达斯查卡雷维尔提;黄晓芸;郑钰;凯文·莱设计研发完成，并于2020-09-29向国家知识产权局提交的专利申请。
本制备双索引甲基化序列文库的方法在说明书摘要公布了：本发明涉及用于产生甲基化序列NGS文库以用于全基因组测序或靶向再测序的方法和组合物。另外，本发明涉及用于确定靶核酸的甲基化谱的方法和组合物。
本发明授权制备双索引甲基化序列文库的方法在权利要求书中公布了：1.一种确定靶核酸的甲基化谱的非诊断方法，所述方法包括： a获得所述靶核酸，将靶核酸末端修复并引入平端，其中得到的经末端修复和具有平端的分子具有5'磷酸化端和游离3'OH端； b用第一连接酶将第一测序接头连接到所述靶核酸的3'端，其中将第一测序接头的一条链5'腺苷酸化以促进连接，同时将互补链在3'端用双脱氧-A、双脱氧-T、双脱氧-C或双脱氧G封闭以防止连接，并且将第一测序接头中的dC碱基变为甲基-dC； c用第二连接酶将第二测序接头连接到所述靶核酸的5'端以产生接头-靶-接头复合物，其中通过使第二测序接头分子的3'端与靶核酸的磷酸化5'端连接的间隙填充连接反应将第二测序接头连接到靶核酸的5'端，第二测序接头中的dC碱基变为甲基-dC，并且在间隙填充连接期间，使用TaqIT聚合酶和具有dATP、dTTP、dGTP和甲基-dCTP的dNTP混合物使互补的UMI碱基聚合； d将所述接头-靶-接头复合物中的未甲基化胞嘧啶转化为尿嘧啶以产生转化的靶； ePCR扩增所述转化的靶； f对所述转化的靶测序；以及 g将所述转化的靶的序列与参考序列比较以确定所述靶核酸的甲基化谱， 其中步骤a至g依次进行，所述靶核酸是双链DNA，所述第一测序接头和第二测序接头均含有独特分子标识符序列。
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