南京师范大学孙小曼获国家专利权
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龙图腾网获悉南京师范大学申请的专利一种共表达PDC-ACC基因的裂殖壶菌工程菌株、构建方法及应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120519301B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-10-03发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202511013153.4,技术领域涉及:C12N1/15;该发明授权一种共表达PDC-ACC基因的裂殖壶菌工程菌株、构建方法及应用是由孙小曼;朱崇昊;李子佳;马旺;许莹霜设计研发完成,并于2025-07-23向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种共表达PDC-ACC基因的裂殖壶菌工程菌株、构建方法及应用在说明书摘要公布了:本发明属于生物工程技术领域,公开了一种共表达PDC‑ACC基因的裂殖壶菌工程菌株、构建方法及应用,所述基因工程菌株是以裂殖壶菌为出发菌株,表达解脂耶氏酵母中的丙酮酸脱羧酶复合物基因PDC、乙酰辅酶A羧化酶基因ACC基因获得的。本发明裂殖壶菌基因工程菌株中的PDC、ACC基因克隆于解脂耶氏酵母为Po1f。传统发酵油脂产量为43.90gL,该工程菌株对PDC、ACC基因进行过表达,使得裂殖壶菌工程菌株的油脂含量提升53.13%,达到67.22gL,DHA含量提高36.97%,从40.71%提高到55.76%。
本发明授权一种共表达PDC-ACC基因的裂殖壶菌工程菌株、构建方法及应用在权利要求书中公布了:1.一种共表达PDC‑ACC基因的裂殖壶菌工程菌株,其特征在于:所述工程菌株是以裂殖壶菌Schizochytrium sp.为出发菌株,表达解脂耶氏酵母Yarrowia lipolytica中的丙酮酸脱羧酶复合物基因PDC、乙酰辅酶A羧化酶基因ACC基因获得的; 其中,所述基因PDC的基因序列为SEQ ID No.1,所述基因ACC的基因序列为SEQ ID No.2; 所述裂殖壶菌为裂殖壶菌HX‑308,所述解脂耶氏酵母为Y. lipolytica Po1f; 如上所述的工程菌株的构建方法,包括如下步骤: S1.重组质粒pzpk‑BleoR‑PDC的构建以质粒pzpk‑BleoR为骨架,在该质粒骨架上插入PDC表达盒,即得重组质粒pzpk‑BleoR‑PDC; S2.重组质粒pzpk‑NeoR‑ACC的构建以质粒pzpk‑NeoR为骨架,在该质粒骨架上插入ACC表达盒,即得重组质粒pzpk‑NeoR‑ACC; S3.表达PDC、ACC基因裂殖壶菌工程菌株的构建将重组质粒pzpk‑BleoR‑PDC和pzpk‑NeoR‑ACC导入裂殖壶菌HX‑308细胞中得重组菌,所得重组菌即为高效生产DHA的裂殖壶菌工程菌株; 步骤S1、S2中,所述PDC表达盒和ACC表达盒的启动子分别为裂殖壶菌的P2845启动子和P2520启动子,终止子分别为裂殖壶菌的T2845终止子和CYC1t终止子; 所述P2845启动子的基因序列如SEQ ID No.8所示,T2845终止子的基因序列如SEQ ID No.11所示,P2520启动子的基因序列如SEQ ID No.16所示,CYC1终止子的基因序列如SEQ ID No.19所示。
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