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中山大学中山眼科中心刘春巧获国家专利权

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龙图腾网获悉中山大学中山眼科中心申请的专利一种体内追踪外段蛋白运输的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119827471B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-10-03发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510162601.0,技术领域涉及:G01N21/64;该发明授权一种体内追踪外段蛋白运输的方法是由刘春巧;谢丽静;郭佃磊设计研发完成,并于2025-02-14向国家知识产权局提交的专利申请。

一种体内追踪外段蛋白运输的方法在说明书摘要公布了:本发明涉及一种体内追踪外段蛋白运输的方法,利用光转化荧光蛋白Dendra2在小鼠体内动态追踪外段蛋白运输的过程及更新动力学,通过示踪异位堆积Rhodopsin来源及去向揭示其引发细胞死亡的通路及路径。在研究理论上,研究结果将有助于Rhodopsin运输及膜盘更新理论的发展,并进一步阐述视网膜变性疾病模型Rhodopsin异常运输过程和方式,有可能发现新的运输方式。在临床治疗上,可以发现视网膜变性疾病患者后期病程的细胞死亡路径,为其药物的开发提供新的靶点及方向。

本发明授权一种体内追踪外段蛋白运输的方法在权利要求书中公布了:1.一种体内追踪外段蛋白运输的方法,其特征在于,包括以下步骤: S1.选择目标基因并将所述目标基因克隆至质粒载体中,所述目标基因包括目标蛋白的基因,所述目标蛋白为外段膜蛋白Rhodopsin,且所述目标蛋白为融合标记蛋白的形式,以便通过荧光显微镜进行观察和追踪; S2.将所述质粒载体转染至宿主细胞中,以实现所述目标蛋白的表达,所述宿主细胞为能够表达目标蛋白的哺乳动物细胞; S3.通过病毒载体包装系统,将所述目标基因包装成病毒载体,所述病毒载体为腺相关病毒AAV载体,并使用所述病毒载体感染哺乳动物体内的视网膜细胞,构建AAV‑hRK‑Rho‑Dendra2质粒;以便在哺乳动物体内实现所述目标蛋白的表达; S4.利用荧光显微镜对所述目标蛋白在细胞内的定位及其动态分布进行观察和记录,并通过荧光标记技术对目标蛋白进行实时追踪,所述荧光标记技术为Dendra2荧光标记; S5.采集并分析所述目标蛋白的动态表达数据,并通过图像处理软件进行定量分析,评估所述目标蛋白在宿主细胞内外的分布及其动态变化; 所述目标蛋白与Dendra2荧光标记蛋白融合,用于追踪所述目标蛋白的动态运输过程; 所述宿主细胞内Rhodopsin‑Dendra2经405nm激发波长完成荧光光转化。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人中山大学中山眼科中心,其通讯地址为:510060 广东省广州市先烈南路54号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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