西安德诺海思医疗科技有限公司郝东获国家专利权
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龙图腾网获悉西安德诺海思医疗科技有限公司申请的专利一种毕赤酵母表达人源化弹性蛋白的纯化方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115819558B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-30发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211575214.2,技术领域涉及:C07K14/78;该发明授权一种毕赤酵母表达人源化弹性蛋白的纯化方法是由郝东;侯增淼;赵硕文;魏文培;周浩;李敏;乔莎;张立峰;崔雪君设计研发完成,并于2022-12-08向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种毕赤酵母表达人源化弹性蛋白的纯化方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种毕赤酵母表达人源化弹性蛋白的纯化方法。向毕赤酵母工程菌的发酵液中加入氯化钠,常温搅拌后离心分离;清洗沉淀中的杂质后在尿素溶液中复溶;通过过滤澄清、超滤浓缩及冷冻干燥,获得纯度大于95%的人源化弹性蛋白,且每升发酵液的纯品产量达0.8g以上、收率大于70%。本发明解决了发酵生产人源化弹性蛋白过程中生产设备功能要求高、纯化工艺流程长、收率低的问题。
本发明授权一种毕赤酵母表达人源化弹性蛋白的纯化方法在权利要求书中公布了:1.一种人源化弹性蛋白的纯化方法,其特征在于:包括以下步骤: 1将毕赤酵母工程菌的发酵液与钠盐混合后于20~30℃下搅拌,使目标蛋白发生变相而析出,然后进行固液分离,得固相A,所述目标蛋白为该发酵液中由毕赤酵母工程菌表达的人源化弹性蛋白; 2将固相A与pH为4~6的含有缓冲盐体系的溶剂混合后于20~30℃下搅拌以溶解固相A中的杂质,然后进行固液分离,得固相B; 3将固相B与含有尿素的溶剂混合,使目标蛋白复溶,然后进行固液分离,得到目标蛋白提取液; 4将目标蛋白提取液经微滤系统过滤澄清后收集滤出液; 5将步骤4收集的滤出液经超滤系统浓缩后收集截留液,将该截留液冷冻干燥,得到人源化弹性蛋白纯品; 所述步骤1中,毕赤酵母工程菌的发酵液的温度为28~35℃; 所述步骤1中,钠盐为氯化钠,氯化钠用量为90gL~117gL;搅拌的时间为1~3h,搅拌转速为180~200rpm; 所述步骤3中,复溶具体包括以下步骤:以1Kg固相B使用≥3L 300gL~360gL尿素水溶液的比例,将固相B与该尿素水溶液混合,然后于20~30℃下搅拌,其中搅拌的时间为1.5~2h,搅拌转速为180~200rpm。
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