广西壮族自治区人民医院宋健获国家专利权
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龙图腾网获悉广西壮族自治区人民医院申请的专利一种单细胞Hi-C文库构建方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN117802205B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-26发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202410031542.9,技术领域涉及:C12Q1/6806;该发明授权一种单细胞Hi-C文库构建方法是由宋健;李小林;韦所苏设计研发完成,并于2024-01-09向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种单细胞Hi-C文库构建方法在说明书摘要公布了:本发明提供一种单细胞Hi‑C文库构建方法,该方法包括:交联样本细胞内的DNA与蛋白质,酶切交联体中的DNA,加测序接头,重连DNA片段,分离单细胞,解交联,加带有细胞条码的文库接头,和文库扩增的步骤。通过本发明方法构建的单细胞Hi‑C文库,建库时间短,成本低,便于实验操作和有效数据比例高。
本发明授权一种单细胞Hi-C文库构建方法在权利要求书中公布了:1.一种单细胞Hi-C文库构建方法,该方法包括下述步骤 交联:将样本细胞内的DNA与蛋白质交联,得到交联体; 酶切:酶切交联体中的DNA,得到交联的DNA片段; 加测序接头:将交联的DNA片段加测序接头,得到加测序接头的DNA片段,所述测序接头包括至少一段测序引物序列; 重连DNA片段:将加测序接头的DNA片段重新连接,得到交联的重连DNA片段; 分离单细胞; 解交联:将交联的重连DNA片段与蛋白质解交联,得到重连DNA片段; 加文库接头,所述文库接头包括第一文库结构序列和第二文库结构序列; 文库扩增:采用带有第一文库结构序列的引物和带有第二文库结构序列的引物,对加文库接头的DNA片段进行扩增,得到单细胞Hi-C文库, 所述测序接头包括至少一段测序引物序列,所述加测序接头的DNA片段通过其添加的测序接头重新连接,所述重连DNA片段内部包括两个测序接头, 所述测序接头由两条DNA单链组成,所述测序引物序列设置在3'端与所述交联的DNA片段相连接的单链上,所述测序引物序列设置在其所在单链的3'端, 所述设置测序引物序列的单链的5'端为突出的核苷酸序列,或,未设置测序引物序列的单链的3'端为突出的核苷酸序列,所述突出的核苷酸序列如下所示: 5'-N1…NmN'1…N'm-3', 其中,N为A、T、C、G脱氧核糖核苷酸中的任意一种,N1…Nm与N'm…N'1为反向互补序列,m为1-4, 其中, 所述第一文库结构序列引物的寡核苷酸序列为:5'-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACAC-3', 所述第二文库结构序列引物的寡核苷酸序列为:5'-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGAT-3'。
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