华南农业大学;岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心陈思璇获国家专利权
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龙图腾网获悉华南农业大学;岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心申请的专利一种基于CRISPR-Cas12a检测禽腺病毒FAdV-4的体系及试剂盒、应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN118910329B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-26发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411075408.5,技术领域涉及:C12Q1/70;该发明授权一种基于CRISPR-Cas12a检测禽腺病毒FAdV-4的体系及试剂盒、应用是由陈思璇;王瀚;陈瑞爱;李佳慧;冯海霞设计研发完成,并于2024-08-07向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种基于CRISPR-Cas12a检测禽腺病毒FAdV-4的体系及试剂盒、应用在说明书摘要公布了:本申请属于生物领域,公开了一种基于CRISPR‑Cas12a检测禽腺病毒FAdV‑4的体系,体系中包含有分别针对禽腺病毒FAdV‑4的Fiber2基因和Hexon基因设计得到的第一RPA引物对和第二RPA引物对、Cas12a蛋白、crRNA‑Fiber2、crRNA‑Hexon、ssDNA‑reporter;此外,本申请还公开了一种基于CRISPR‑Cas12a检测禽腺病毒FAdV‑4的试剂盒,包含有上述体系外,还包含有Buffer、RNase‑freeH2O、RnaseInhibitor以及DNA质粒。
本发明授权一种基于CRISPR-Cas12a检测禽腺病毒FAdV-4的体系及试剂盒、应用在权利要求书中公布了:1.一种基于CRISPR-Cas12a检测禽腺病毒FAdV-4的试剂,其特征在于,所述基于CRISPR-Cas12a检测禽腺病毒FAdV-4的体系包括有第一RPA引物对、第二RPA引物对、Cas12a蛋白、crRNA-Fiber2、crRNA-Hexon、ssDNA-reporter、DNA质粒; 所述第一RPA引物对包括上游引物RPA-FI-F及下游引物RPA-FI-R,且第一RPA引物对是针对禽腺病毒FAdV-4的Fiber2基因设计得到; 所述第二RPA引物对包括上游引物RPA-HE-F及下游引物RPA-HE-R,且第二RPA引物对是针对禽腺病毒FAdV-4的Hexon基因设计得到; 所述crRNA-Fiber2是针对禽腺病毒FAdV-4的Fiber2基因设计得到; 所述crRNA-Hexon是针对禽腺病毒FAdV-4的Hexon基因设计得到; 在基于CRISPR-Cas12a检测禽腺病毒FAdV-4的体系的工作过程中,crRNA-Fiber2或crRNA-Hexon与DNA质粒、Cas12a蛋白形成三元复合体时,引导Cas12a蛋白对第一RPA引物对、第二RPA引物对的扩增产物进行正向剪切,同时Cas12a蛋白自发的反向切割ssDNA-reporter并释放荧光基团; 所述第一RPA引物对中上游引物RPA-FI-F的序列如SEQIDNO.1所示; 所述第一RPA引物对下游引物RPA-FI-R的序列如SEQIDNO.2所示; 所述第二RPA引物对上游引物RPA-HE-F的序列如SEQIDNO.3所示; 所述第二RPA引物对下游引物RPA-HE-R的序列如SEQIDNO.4所示; 所述crRNA-Fiber2上游引物crRNA-Fiber2-F的序列为如SEQIDNO.5所示; 所述crRNA-Fiber2下游引物crRNA-Fiber2-R的序列为如SEQIDNO.6所示; 所述crRNA-Hexon上游引物crRNA-Hexon-F的序列为如SEQIDNO.7所示; 所述crRNA-Hexon下游引物crRNA-Hexon-R的序列为如SEQIDNO.8所示。
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