华南农业大学沈兴获国家专利权
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龙图腾网获悉华南农业大学申请的专利一种基于RPA-CRISPR的唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(椰毒假单胞菌酵米面亚种)特异性靶标、引物和检测体系及方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN118957112B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-26发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411143529.9,技术领域涉及:C12Q1/689;该发明授权一种基于RPA-CRISPR的唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(椰毒假单胞菌酵米面亚种)特异性靶标、引物和检测体系及方法是由沈兴;谢宇;雷红涛;徐振林;刘艳;朱宇赫设计研发完成,并于2024-08-20向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种基于RPA-CRISPR的唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(椰毒假单胞菌酵米面亚种)特异性靶标、引物和检测体系及方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种基于RPA‑CRISPR的唐菖蒲伯克霍尔德氏菌椰毒假单胞菌酵米面亚种特异性毒力基因靶标、引物和检测体系及方法。本发明所述靶标序列、RPA引物和crRNA具有良好的特异性,所构建的检测方法对其它亚种无特异性识别反应,检测结果准确可靠。此外,本发明所述检测方法结合煮沸法或试剂盒提取样品DNA,在不进行菌体富集的前提下,对唐菖蒲伯克霍尔德氏菌椰毒假单胞菌酵米面亚种基因组DNA的检测灵敏度为10‑4ngμL,菌液灵敏度为1.52CFUmL。对于椰汁、大米粉和糯米粉进行添标检测,样本检出限均达到100CFUmL,样本前处理简单,操作便捷,灵敏度高,可靠性高,适用于相关监管部门对唐菖蒲伯克霍尔德氏菌椰毒假单胞菌酵米面亚种的现场快速检测。
本发明授权一种基于RPA-CRISPR的唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(椰毒假单胞菌酵米面亚种)特异性靶标、引物和检测体系及方法在权利要求书中公布了:1.一种用于检测唐菖蒲伯克霍尔德氏菌椰毒假单胞菌酵米面亚种(B.gladiolipv.cocovenenans)的RPA-CRISPRCas12a组合物,其特征在于,包括基于毒力基因的唐菖蒲伯克霍尔德氏菌椰毒假单胞菌酵米面亚种特异性碱基序列、RPA引物D11-F和D11-R、crRNA、CRISPRCas12a蛋白和ssDNA-FQ探针;所述碱基序列如SEQIDNO.1所示,所述RPA引物D11-F和D11-R的序列如SEQIDNO.2~3所示,所述crRNA的序列如SEQIDNO.4所示,所述ssDNA-FQ的序列如SEQIDNO.5所示。
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