深圳市勤业医药科技有限公司毛佳佳获国家专利权
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龙图腾网获悉深圳市勤业医药科技有限公司申请的专利一种利用Cre-loxP系统来制备Scn1a+/-模型小鼠的新方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN118947634B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-26发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411382524.1,技术领域涉及:C12N15/63;该发明授权一种利用Cre-loxP系统来制备Scn1a+/-模型小鼠的新方法是由毛佳佳;陈慧慧;李长春;陈粮设计研发完成,并于2024-09-30向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种利用Cre-loxP系统来制备Scn1a+/-模型小鼠的新方法在说明书摘要公布了:本发明涉及脑神经动物模型技术领域,尤其涉及了一种利用Cre‑loxP系统来制备Scn1a+‑模型小鼠的方法如图1。用100%C57背景Scn1afloxflox小鼠与野生型100%129背景小鼠进行杂交,获得F1代背景理论值是50%C5750%129的Scn1aflox+小鼠。Scn1aflox+小鼠重复与野生型100%129背景小鼠进行杂交,重复3轮后获得F4代背景理论值是6.25%C5793.75%129的Scn1aflox+小鼠。F4代背景理论值是6.25%C5793.75%129的Scn1aflox+小鼠再与100%C57背景Cre小鼠进行杂交,获得背景接近为50%C5750%129的Scn1a+‑模型小鼠如图4。该方法制备的50%C5750%129的Scn1a+‑模型小鼠具有基因背景清晰、遗传稳定、性状不分离,且实验操作容易等优点,尤其是在同一个时期可以大批量获得50%C5750%129的Scn1a+‑模型小鼠如图5。该模型小鼠与野生型小鼠相比较有明显的表型差异,因此能够快速推进抗Dravet综合征药物的研发速度。
本发明授权一种利用Cre-loxP系统来制备Scn1a+/-模型小鼠的新方法在权利要求书中公布了:1.一种利用Cre-loxP系统来制备Scn1a +-模型小鼠的方法,其特征在于,包括以下步骤: S1:用100%C57背景Scn1a floxflox 小鼠与野生型100%129背景小鼠进行杂交,获得F1代背景理论值是50%C5750%129的Scn1a flox+ 小鼠; S2:在此基础上,F1代背景理论值是50%C5750%129的Scn1a flox+ 小鼠与野生型100%129小鼠进行杂交,获得F2代背景理论值是25%C5775%129的Scn1a flox+ 小鼠; S3:在此基础上,F2代背景理论值是25%C5775%129的Scn1a flox+ 小鼠与野生型100%129小鼠进行杂交,获得F3代背景理论值是12.5%C5787.5%129的Scn1a flox+ 小鼠; S4:在此基础上,F3代背景理论值是25%C5775%129的Scn1a flox+ 小鼠与野生型100%129小鼠进行杂交,获得F4代背景理论值是6.25%C5793.75%129的Scn1a flox+ 小鼠; S5:Scn1a flox+ 小鼠重复与野生型100%129小鼠进行杂交,重复次数≥3轮; S6:Scn1a flox+ 小鼠重复与野生型100%129小鼠进行杂交,重复3轮后,F4代背景理论值是6.25%C5793.75%129的Scn1a flox+ 小鼠与100%C57背景Cre小鼠进行杂交,获得背景接近为50%C5750%129的Scn1a +- 模型小鼠; 所述S1中100%C57背景Scn1a floxflox 的小鼠是在小鼠Scn1a基因26号外显子两侧加入同方向的loxP位点,是含有纯合loxP的小鼠; 所述S1中50%C5750%129的Scn1a flox+ 的小鼠是在小鼠Scn1a基因26号外显子两侧加入同方向的loxP位点,含有杂合loxP的小鼠,小鼠基因型背景为50%C5750%129; 所述S3中25%C5775%129Scn1a flox+ 的小鼠是在小鼠Scn1a基因26号外显子两侧加入同方向的loxP位点,含有杂合loxP的小鼠,小鼠基因型背景为25%C5775%129; 所述S3中12.5%C5787.5%129Scn1a flox+ 的小鼠是在小鼠Scn1a基因26号外显子两侧加入同方向的loxP位点,含有杂合loxP的小鼠,小鼠基因型背景为12.5%C5787.5%129; 所述S6中6.25%C5793.75%129Scn1a flox+ 的小鼠是在小鼠Scn1a基因26号外显子两侧加入同方向的loxP位点,含有杂合loxP的小鼠,小鼠基因型背景为6.25%C5793.75%129。
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