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龙图腾网获悉上海理工大学申请的专利框架核酸协同增强点击化学和DNAzyme催化电极的制备方法及应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119510543B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-26发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202411527624.9，技术领域涉及：G01N27/48；该发明授权框架核酸协同增强点击化学和DNAzyme催化电极的制备方法及应用是由徐斐;叶泰;徐逸敏;曹慧;袁敏;吴秀秀;阴凤琴;郝丽玲设计研发完成，并于2024-10-30向国家知识产权局提交的专利申请。

本框架核酸协同增强点击化学和DNAzyme催化电极的制备方法及应用在说明书摘要公布了：本发明公开了一种框架核酸协同增强点击化学和DNAzyme催化电极的制备方法及应用。本发明将叠氮基团修饰的分裂G‑四链体片段A通过Hoogsteen氢键组装到DNA四面体的双链DNAdsDNA棱上，使得反应物实现合理的空间分布，提高界面上点击化学反应效率。在CuI催化条件下，炔烃基团修饰的分裂G‑四链体片段B与四面体支架上组装的片段A通过点击化学反应形成完整G‑四链体。进一步与Hemin复合，所形成的G‑四链体G‑quadruplexhemin复合物具有类过氧化物酶活性。同时，具有强电负性特征的核酸框架进一步增强催化氧化TMB的响应电流，实现Cu2+和碱性磷酸酶的灵敏检测。

本发明授权框架核酸协同增强点击化学和DNAzyme催化电极的制备方法及应用在权利要求书中公布了：1.一种催化电极在检测铜离子（Cu2+）和碱性磷酸酶中的应用，其特征在于，所述催化电极的制备方法包括以下步骤： 步骤1）：将金电极进行打磨预处理； 步骤2）：将DNA四面体与步骤1）所得的金电极共孵育，然后与MCH共孵育，得到DNA四面体修饰的金电极Au-TDN； 步骤3）：将步骤2）中所得DNA四面体修饰的金电极Au-TDN，与带有分裂G-四链体A的三链体探针在中性缓冲液中进行孵育，即得到催化电极Au-TDN-TE-G1；所述三链体探针从5’端到3’端分别是富胸腺嘧啶锚定区、聚胸腺嘧啶间隔区和G-四链体A片段，且3’端修饰有叠氮基团；其中，所述富胸腺嘧啶锚定区富含胸腺嘧啶，在pH为中性条件下，通过Hoogsteen氢键组装到DNA四面体的双链DNAdsDNA棱上，从而形成三链体螺旋结构；所述分裂G-四链体A片段的序列为GTGG； 所述检测铜离子的方法包括：将制备得到的催化电极Au-TDN-TE-G1与待测样本孵育，并加入抗坏血酸钠、炔烃修饰的分裂G-四链体B（G2），待点击化学反应完成后，与hemin和K+共孵育，通过电化学测量电流强度的变化，实现待测样本中铜离子的检测；所述炔烃修饰的分裂G-四链体B的序列如SEQIDNO：12所示； 其中，所述检测的原理为：如果待测样本中含有铜离子，在抗坏血酸钠的作用下二价铜离子被还原为一价铜离子，在一价铜离子的催化下，催化电极Au-TDN-TE-G1中探针修饰的叠氮基团与炔烃修饰的分裂G-四链体B间进行点击化学反应，实现核酸片段的共价连接，所形成完整的G-四链体在钾离子存在条件下与Hemin复合，所形成的G-四链体（G-quadruplex）hemin复合物具有类过氧化物酶活性，同时借助核酸框架的电负性特征进一步增强氧化态TMB峰电流的强度，从而导致电流强度发生变化；如果待测样本中不含铜离子，则体系中电流强度不会发生变化； 所述检测碱性磷酸酶的方法包括：将待测样本与抗坏血酸磷酸钠盐预先反应生成抗坏血酸，然后加入催化电极Au-TDN-TE-G1、炔烃修饰的分裂G-四链体B（G2）和一定浓度的铜离子溶液混合反应，待点击化学反应完成后，与hemin和K+共孵育，通过电化学测量电流强度的变化，实现待测样本中铜离子的检测；所述炔烃修饰的分裂G-四链体B的序列如SEQIDNO：12所示； 其中，所述检测的原理为：如果待测样本中含有铜离子，在抗坏血酸钠的作用下二价铜离子被还原为一价铜离子，在一价铜离子的催化下，催化电极Au-TDN-TE-G1中探针修饰的叠氮基团与炔烃修饰的分裂G-四链体B间进行点击化学反应，实现核酸片段的共价连接，所形成完整的G-四链体在钾离子存在条件下与Hemin复合，所形成的G-四链体（G-quadruplex）hemin复合物具有类过氧化物酶活性，同时借助核酸框架的电负性特征进一步增强氧化态TMB峰电流的强度，从而导致电流强度发生变化；如果待测样本中不含碱性磷酸酶，则体系中电流强度不会发生变化。

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