广州创尔生物技术股份有限公司陈微获国家专利权
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龙图腾网获悉广州创尔生物技术股份有限公司申请的专利一种利用自组装性能检测活性胶原蛋白含量的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120446500B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-26发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510962434.8,技术领域涉及:G01N33/68;该发明授权一种利用自组装性能检测活性胶原蛋白含量的方法是由陈微;周颖;李思祥;彭琪惠;叶春婷设计研发完成,并于2025-07-14向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种利用自组装性能检测活性胶原蛋白含量的方法在说明书摘要公布了:本发明属于天然活性胶原蛋白技术领域,具体涉及一种利用自组装性能检测活性胶原蛋白含量的方法。本发明利用具有完整三螺旋结构的活性胶原蛋白特有的自组装性能,通过PBS缓冲液诱导活性胶原蛋白发生自组装形成胶原纤维,同时使用胰蛋白酶将已变性的胶原蛋白进一步酶解成小分子,然后通过超滤离心将沉淀的胶原纤维和变性的多肽溶液分离,通过检测沉淀中胶原蛋白的含量即可简单快速地对胶原中活性胶原的含量进行定量分析;且本发明所述检测方法可用于检测胶原蛋白溶液、敷料、海绵、粉剂、凝胶制剂等多种剂型胶原蛋白产品中活性胶原的含量,使用范围广。
本发明授权一种利用自组装性能检测活性胶原蛋白含量的方法在权利要求书中公布了:1.一种检测活性胶原蛋白含量的方法,其特征在于,包括以下步骤: S1、将待测样品用纯水或酸性溶液溶解或稀释,得到待测样品溶液; S2、向待测样品溶液中加入胰蛋白酶消化液和PBS缓冲液,调节pH后进行自组装,得到自组装溶液; S3、将自组装溶液进行第一次超滤离心,保留上清液和沉淀,将上清液置于超滤管滤芯中进行第二次超滤离心,将滤芯取出倒扣于沉淀中进行第三次超滤离心,使沉淀与滤芯中的浓缩液混合,得到自组装胶原蛋白; S4、采用福林酚法测定自组装胶原蛋白含量和自组装前待测样品的胶原蛋白含量,计算自组装胶原蛋白含量和自组装前待测样品的胶原蛋白含量的比值,即得到待测样品中活性胶原蛋白的含量; 所述步骤S2中,所述自组装溶液中总蛋白的终浓度为0.5-1mgmL;所述胰蛋白酶与自组装溶液中总蛋白的质量比为1:(10-20); 所述步骤S3中,所述第一次超滤离心的具体条件为:在10000-20000g条件下离心15-30min;所述第二次超滤离心的具体条件为:在7500-14000g条件下离心20-30min;所述第三次超滤离心的具体条件为:在7500-14000g条件下离心3-5min; 所述步骤S2中,所述自组装的具体条件为:在28-32℃下自组装1-48h;调节pH为7。
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