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北京市农林科学院平华获国家专利权

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龙图腾网获悉北京市农林科学院申请的专利一种水果中草甘膦及其代谢物的检测方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116465988B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-23发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310267979.8,技术领域涉及:G01N30/02;该发明授权一种水果中草甘膦及其代谢物的检测方法是由平华;赵天宇;马智宏;李成;李杨;孔红玲;付海龙设计研发完成,并于2023-03-15向国家知识产权局提交的专利申请。

一种水果中草甘膦及其代谢物的检测方法在说明书摘要公布了:本发明提供了一种水果中草甘膦及其代谢物的检测方法,其包括S1、制备提取液;S2、提取液的净化;S3、提取液衍生化;S4、草甘膦含量测定,采用同位素稀释内标‑高效液相色谱串联质谱法定量;同时用上述样品不加内标的空白提取液加入草甘膦、氨甲基膦酸和草甘膦GLY‑13C2,15N内标制备混合标准工作溶液;同时进行步骤S3‑S4,制作标准曲线,计算样品中草甘膦及其代谢物的含量。本发明采用同位素内标法定量,可有效提高回收率,降低基质效应,提高定量结果准确度。本发明所用衍生试剂专属性强、用量少,衍生步骤简单,耗时短,重现性好,灵敏度高,适用于复杂水果基质样品中草甘膦及其代谢物的同时测定,具有较强的实用性。

本发明授权一种水果中草甘膦及其代谢物的检测方法在权利要求书中公布了:1.一种水果中草甘膦及其代谢物的检测方法,其特征在于,其包括如下步骤: S1、将待测水果样品中草甘膦及其代谢物用水提取出来,制备获得提取液; S2、提取液的净化; S3、将净化后的提取液加入衍生化试剂进行衍生化;所述衍生化试剂为6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺氨基甲酸酯; S4、草甘膦含量测定,采用同位素稀释内标-高效液相色谱串联质谱法定量; 同时用不加内标的水果样品的空白提取液加入草甘膦、氨甲基膦酸和草甘膦GLY-13C2,15N内标制备混合标准工作溶液;同时进行步骤S3-S4,进行检测,分别以草甘膦衍生物和氨甲基膦酸衍生物的峰面积与内标衍生物峰面积比值为纵坐标,草甘膦和氨甲基膦酸浓度与内标浓度比值为横坐标,制作标准曲线,得到线性回归方程,将测定的待测样品中草甘膦和氨甲基膦酸峰面积与内标峰面积比值代入线性回归方程,获得提取液中草甘膦及其代谢物的浓度,然后根据提取液所代表试样的质量计算得到对应样品中草甘膦及其代谢物的含量; 其中,在步骤S1中,提取液的制备具体是将水果用冷冻干燥机冻干后,研磨成细粉末;称取细粉末加入草甘膦GLY-13C2,15N作为内标,加水超声提取,离心后取上层的提取液; 其中,在步骤S2中,将提取液加入二氯甲烷,混匀后,离心,取上清液Ⅰ,加入交联聚乙烯吡咯烷酮,混合后离心,获得上清液II;MCX柱净化分别用甲醇、水活化,吸取上清液II过柱,弃去滤液,再次用上清液II上样,收集滤液,离心后,得到上清液III,待衍生化; 其中,在步骤S3中,将上清液III加入pH为8.8的硼酸钠缓冲液,混匀后,加入6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺氨基甲酸酯,混匀后,进行进样检测; 其中,在步骤S4中,液相色谱串联质谱的色谱条件为:色谱柱:ACQUITYUPLCHSST3,规格为100×2.1mm,粒径为1.8μm; 流动相A:5mmolL甲酸铵、0.3%甲酸水溶液; 流动相B:纯乙腈; 柱温:50℃;流速:0.45mLmin; 梯度洗脱比例: 0-0.5min,2.0%B; 0.5-5.0min,2.0%-8.0%B; 5.0-6.0min,8.0%-20.0%B; 6.0-7.0min,20.0%-60.0%B; 7.0-8.0min,60.0%B; 8.0-10.0min,2.0%B; 所述液相色谱串联质谱的质谱条件为: 离子源:电喷雾电离源ESI;扫描方式:正离子;监测模式:多反应监测模式MRM;毛细管电压:2.7kV,正离子模式,ESI+;雾化气温度:500℃;去溶剂气流量:1000L·h-1;离子源温度:150℃; 草甘膦衍生物的质谱分析参数:保留时间为2.00min,母离子339.83mz,子离子115.95mz、170.90*mz,锥孔电压15V,碰撞能量55、15eV; 草甘膦-13C2,15N衍生物的质谱分析参数:保留时间为2.00min,母离子342.83mz,子离子115.95mz、170.90*mz,锥孔电压15V,碰撞能量55、15eV; 氨甲基膦酸衍生物的质谱分析参数:保留时间为2.56min,母离子281.86mz,子离子116.00mz、170.90*mz,锥孔电压15V,碰撞能量55、25eV,其中*代表定量离子。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人北京市农林科学院,其通讯地址为:100097 北京市海淀区曙光花园中路9号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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