中国科学院大连化学物理研究所靳艳获国家专利权
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龙图腾网获悉中国科学院大连化学物理研究所申请的专利一种发酵法生产纯化牛乳抗菌肽及其制备方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119391797B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-23发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202311609122.6,技术领域涉及:C07K14/47;该发明授权一种发酵法生产纯化牛乳抗菌肽及其制备方法是由靳艳;于文皓设计研发完成,并于2023-11-29向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种发酵法生产纯化牛乳抗菌肽及其制备方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种发酵法制备对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌有广泛抑制活性的牛乳抗菌肽的制备方法及应用,以乳蛋白为原料,通过微生物发酵法以及多级膜分离纯化工艺制备牛乳抗菌肽,利用本方法制备牛乳抗菌肽的收率可达18~30%,产物中肽含量为60~85%。本发明制备的牛乳抗菌肽对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌具有抑制活性。所制备的牛乳抗菌肽可用于制备预防和或降低由大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、牙龈卟啉单胞菌和变异链球菌引起的感染疾病药物和或保健品、食品、护肤品,也可作食品保鲜剂、口腔抑菌剂、防腐剂等,具有良好的应用前景。
本发明授权一种发酵法生产纯化牛乳抗菌肽及其制备方法在权利要求书中公布了:1.一种发酵法制备得到的牛乳抗菌肽的应用,其特征在于:经过发酵、离心、超滤分离、纳滤浓缩和干燥,最终得到牛乳抗菌肽; 具体包括如下步骤: (1)培养基制备及发酵培养 配制乳蛋白质质量浓度为12%的脱脂奶粉水溶液为发酵培养基,充分混合均匀后110℃灭菌15min;保加利亚乳杆菌、瑞士乳杆菌和短双岐杆菌菌株分别以甘油保藏法保存于-80℃,实验前将200μL菌液接种到10mL上述步骤中制备得到的无菌脱脂奶粉培养基中,接种量为2%(VV),于厌氧环境35℃温度条件下培养8h使菌种复苏,重复上述复苏操作2次; 以2%接种量接菌于发酵培养基中,发酵液中菌含量为1×10^8CFUmL,于厌氧环境、200rpm、35℃温度条件下发酵30h;121℃灭菌20min使菌种灭活,结束发酵; (2)抗菌肽纯化 发酵液于6000转分钟、4℃条件下离心20min,去除发酵液中的杂质及不溶性物质,保留离心后上清液;发酵上清液用纯水稀释至4倍原上清液体积,经截留分子量为5kDa超滤膜分离,收集超滤液;发酵超滤液再经截留分子量为150Da的纳滤膜分离,浓缩至发酵液初始体积,收集纳滤截留液; (3)收集纳滤截留液干燥得到牛乳抗菌肽;-20℃冷冻保存; 所述发酵法步骤制备得到的牛乳抗菌肽用于制备细菌生长抑制剂或杀菌剂,所述抗菌肽对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、疮疱丙酸杆菌、铜绿假单胞菌、牙龈卟啉单胞菌和变异链球菌中的一种或者两种以上有生长抑制活性。
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