复旦大学任煜轩获国家专利权
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龙图腾网获悉复旦大学申请的专利一种结合光镊的受激拉曼显微成像装置获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115078326B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-19发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202210658622.8,技术领域涉及:G01N21/65;该发明授权一种结合光镊的受激拉曼显微成像装置是由任煜轩;孔慈航;李博设计研发完成,并于2022-06-11向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种结合光镊的受激拉曼显微成像装置在说明书摘要公布了:本发明属于单细胞化学成像技术领域,具体为一种结合光镊的受激拉曼显微成像装置。本发明装置包括激光光镊光路、拉曼成像光路以及显微镜等;光镊光路将激光通过二向色镜耦合到显微镜物镜实现强聚焦而形成强的梯度力光阱;拉曼光路包含时域同步、空间重合的两路脉冲光,两路脉冲激光经扫描振镜扫描后由光路系统耦合到显微镜实现光束在样品上的二维扫描;光镊采用位置敏感探测器实现细胞等样品位置的实时记录,拉曼成像采用光电倍增管或光电探测器经锁相放大后输出。共定位的拉曼光源通过扫描可实现样品多种组分的化学成像。所发明的装置可用来对细胞中多种化学成分进行拉曼共定位成像,在细胞组分分析和组分分布测量等领域具有重要的应用。
本发明授权一种结合光镊的受激拉曼显微成像装置在权利要求书中公布了:1.一种结合光镊的受激拉曼显微成像装置,其特征在于,包括激光光镊部分、拉曼显微镜部分以及两者的耦合;用于做受激拉曼成像,或者做相干反斯托克斯成像,或者同时做两种模式的成像;其中: 所述激光光镊部分,包括依次光路连接的光镊激光、显微镜物镜、微流道样品池、搜集物镜、成像管镜、位置敏感探测器以及必要的透镜和反射镜;由高数值孔径的显微镜物镜将激光束聚焦到衍射极限大小,具体为200-500nm;在光斑附近的微米纳米粒子因光强梯度力的作用被吸引到光镊中; 所述光镊采用近红外激光对细胞生物粒子进行无接触、无损伤捕获,并对细胞进行无接触的固定,为细胞实现较长时间扫描成像提供稳定的位置固定; 所述拉曼显微镜部分,包括依次光路连接的两个脉冲激光、扫描转镜、扫描透镜、成像透镜、显微镜物镜、搜集透镜、成像管镜、滤波片、光电倍增管以及锁相放大器;两个脉冲激光在时域上以及空间上同步; 所述拉曼显微镜通过泵浦光和斯托克斯光与样品的相互作用实现共振拉曼成像或者相干反斯托克斯成像;通过调节光电倍增管前的滤波片的透过率波段,实现共振拉曼成像和相干反斯托克斯成像的切换,或者设计双通道分别实现受激拉曼成像和相干反斯托克斯成像; 所述的激光光镊和拉曼成像的耦合,采用双色镜将光镊激光和拉曼激发光耦合到显微镜系统;再采用双色镜将光镊激光和拉曼信号光在空间上分开,拉曼信号包括受激拉曼散射或者相干反斯托克斯散射光; 所述的激光光镊,采用与拉曼显微镜激发光与发射光光谱不重叠的激光实现;光镊的中心波长是比斯托克斯谱线更长的波长,或者比反斯托克斯谱线更短的波长,或者是介于斯托克斯或反斯托克斯谱线与拉曼激发光之间的任何波长; 拉曼显微镜部分中的扫描转镜、扫描透镜、成像透镜、显微镜物镜组成扫描单元;由扫描振镜对共轴的拉曼泵浦光源和探测光进行二维角度扫描,再经扫描透镜、成像透镜、显微镜物镜后,对空间上重合的两个光斑在样品上实现二维扫描;由于泵浦光和探测光在空间上重叠,因而在扫描过程中,能够在样品空间上重叠;同时在其中一条光路引出延迟调制单元,确保两个脉冲序列在样品上实现时间同步;时间和空间的同时同步为激发拉曼信号提供可能; 所述的拉曼成像通过扫描单元对两个空间上重合的激光束进行扫描,并经过激发样品后由光电倍增管搜集到受激拉曼散射或相干反斯托克斯信号后,再由计算机重构的二维图像; 光镊部分和拉曼显微镜分别设有各自的探测单元; 光镊部分的位置敏感探测器作为探测单元,并结合后焦面干涉法,对光镊中捕获的粒子的位置进行高精度的探测;由于直接探测捕获激光的信号,引入中性密度衰减片对激光功率进行适当调整; 拉曼显微镜部分的以光电倍增管作为探测单元,对拉曼信号进行探测;由于拉曼信号的强度比较弱,需要结合锁相放大器对信号进行放大;为实现锁相放大,需要对拉曼激发光的强度进行调制,这里的调制信号将做为锁相放大的参考输入;光电倍增管的信号只有频率与拉曼激发光调制频率一致的信号被放大输出。
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