南京大学;南开大学罗义获国家专利权
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龙图腾网获悉南京大学;南开大学申请的专利一种基于纳米抗体-单抗夹心检测新型冠状病毒核衣壳蛋白的均相方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116577501B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-19发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211023374.6,技术领域涉及:G01N33/569;该发明授权一种基于纳米抗体-单抗夹心检测新型冠状病毒核衣壳蛋白的均相方法是由罗义;胡文进;毛大庆;袁青彬;蔺怀;刘奕辰设计研发完成,并于2022-08-25向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种基于纳米抗体-单抗夹心检测新型冠状病毒核衣壳蛋白的均相方法在说明书摘要公布了:一种基于纳米抗体‑单抗夹心检测新型冠状病毒核衣壳蛋白的均相方法,涉及抗原检测领域,本发明制备了多种新型冠状病毒核衣壳蛋白纳米抗体做为固相抗体,核衣壳蛋白单克隆抗体作为检测抗体,新型冠状病毒N蛋白作为检测靶标,通过酶联免疫吸附实验筛选出一组检测性能优良的抗体对,最低检测线为0.8ngmL。此外,一步活化法将纳米抗体、单克隆抗体分别偶联到量子点微球及磁性纳米微球的表面,成功制备两种靶向新型冠状病毒核衣壳蛋白的探针,并构建了一种快速检测新型冠状病毒核衣壳蛋白的磁分离免疫均相方法,核衣壳蛋白的最低检测线为0.15ngmL。本发明操作简单、成本低廉、反应速度快、可实现原位检测、配对抗体筛选效率高,在新型冠状病毒的快速检测中具有良好的应用前景。
本发明授权一种基于纳米抗体-单抗夹心检测新型冠状病毒核衣壳蛋白的均相方法在权利要求书中公布了:1.一种基于纳米抗体-单抗夹心检测新型冠状病毒核衣壳蛋白的均相方法,其特征在于,包括以下步骤: A、使用大肠杆菌表达系统制备了新冠N蛋白和新冠N蛋白纳米抗体N1、N2、N3、N4,并进一步鉴定了表达的新冠N蛋白及纳米抗体的纯度与生物学活性; B、将制备的纳米抗体作为包被抗体,单克隆抗体作为配对抗体; C、将纳米抗体偶联至量子点微球表面,制备了靶向新冠N蛋白的荧光纳米探针,为均相快检体系提供检测信号; D、将新冠N蛋白单克隆抗体偶联至磁性纳米微球的表面,制备了靶向新冠N蛋白的磁性纳米探针,为均相体系快速分离核衣壳蛋白奠定基础; E、将制备的两种纳米探针投入不同浓度的新冠N蛋白中,建立了均相检测新冠N蛋白的免疫分析法,最低检测线为150pgmL; 新冠N蛋白单克隆抗体配对纳米抗体N1、N2、N3、N4和新冠N蛋白的序列分别为:SEQIDNO:1、SEQIDNO:2、SEQIDNO:3、SEQIDNO:4、SEQIDNO:5。
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