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龙图腾网获悉广西中医药大学申请的专利用于同时定量检测HBV cccDNA和HBV rcDNA的核酸组合、试剂盒及方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116064955B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-19发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202211246673.6，技术领域涉及：C12Q1/70；该发明授权用于同时定量检测HBV cccDNA和HBV rcDNA的核酸组合、试剂盒及方法是由杨庆利;李海;梁亮设计研发完成，并于2022-10-12向国家知识产权局提交的专利申请。

本用于同时定量检测HBV cccDNA和HBV rcDNA的核酸组合、试剂盒及方法在说明书摘要公布了：本发明提供了用于同时定量检测HBVcccDNA和HBVrcDNA的核酸组合、试剂盒及方法，涉及分子生物学技术领域。所述核酸组合包括：跨越所述HBVrcDNA负链上的缺口的简并引物，所述简并引物如SEQIDNo.1或SEQIDNo.2所示；以及用于扩增HBVDNA的qPCR引物，所述qPCR引物用于扩增HBVPreCC基因或S基因。本发明利用cccDNA和rcDNA分子结构差异，设计引物使cccDNA正链模板拷贝数等比例增加，之后与未进行cccDNA预扩增的样品同时进行qPCR，定量HBVDNA并对比，计算出cccDNA和rcDNA的初始拷贝数。本发明能够简单高效地同时实现对HBVcccDNA和rcDNA的准确和高效定量。

本发明授权用于同时定量检测HBV cccDNA和HBV rcDNA的核酸组合、试剂盒及方法在权利要求书中公布了：1.一种以非疾病诊断和或治疗为目的的定量检测HBVcccDNA和HBVrcDNA的方法，其特征在于，包括： （a）使用如SEQIDNo.1所示的简并引物预扩增HBVcccDNA； 预扩增HBVcccDNA反应液如下，总体积5μL： 2×TBGreenFastqPCRMix2.5μL； HBVDNA模板1.0μL； 10μM的SEQIDNo.1的简并引物0.1μL； ddH2O1.4μL； 预扩增HBVcccDNA反应条件如下： （b）使用qPCR的上下游引物同时定量检测HBVcccDNA和rcDNA； HBVDNAqPCR条件如下： HBVDNA定量反应液如下，总体积40μL； 2×TBGreenFastqPCRMix17.5μL； 第一步PCR反应液5.0μL； 25μM的上游引物0.8μL； 25μM的下游引物0.8μL； ddH2O15.9μL； HBVDNA对照qPCR：定量HBV总DNA的拷贝数；反应液如下，总体积40μL； 2×TBGreenFastqPCRMix20.0μL； HBVDNA模板1.0μL； 25μM的上游引物0.8μL； 25μM的下游引物0.8μL； ddH2O17.4μL； 所述HBV的基因型为C、B和I，所述上下游引物如SEQIDNo.3和SEQIDNo.4所示； （c）根据定量方程组，通过计算HBVcccDNA预扩增前后DNA模板的增加量以及比较qPCR所得到的HBV总DNA的拷贝数，计算出HBVcccDNA和HBVrcDNA初始拷贝数； 定量方程组如下所示： ； c：标本初始HBVcccDNA的拷贝数； r：标本初始HBVrcDNA的拷贝数； N0：cccDNA预扩增前HBVDNA定量拷贝数； Nn：cccDNA预扩增n个循环后HBVDNA定量拷贝数。

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