大连理工大学赵慧敏获国家专利权
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龙图腾网获悉大连理工大学申请的专利一种基于连续变色银纳米簇信号放大同时检测两种ARGs的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116334203B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-19发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310137057.5,技术领域涉及:C12Q1/6876;该发明授权一种基于连续变色银纳米簇信号放大同时检测两种ARGs的方法是由赵慧敏;陈娜红设计研发完成,并于2023-02-20向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种基于连续变色银纳米簇信号放大同时检测两种ARGs的方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种基于连续变色银纳米簇信号放大同时检测两种ARGs的方法,属于分析检测技术领域。本发明检测方法所用的探针包括探针DNA银纳米簇H1‑AgNCs和探针增强序列H2,其中,H1‑AgNCs的两端分别稳定了不同弱荧光发射的银纳米簇,增强序列H2的两端则分别富含G和T序列。目标基因和两条探针序列交替连接,变色银纳米簇靠近富GT序列,调谐和放大荧光信号。本发明通过设计两条DNA链即可实现两种ARGs的无酶、简便、高特异性同时检测,同时,由目标基因连接的含有连续变色银纳米簇信标的线性DNA结构实现了两种荧光信号的转导和放大,可广泛用于各种环境水体样本中抗生素抗性基因的快速筛查或定量检测。
本发明授权一种基于连续变色银纳米簇信号放大同时检测两种ARGs的方法在权利要求书中公布了:1.一种基于变色银纳米簇的ARGs检测方法,其特征在于,所述的检测方法为非疾病的治疗与诊断方法,包括如下步骤:将荧光探针DNA银纳米簇H1-AgNCs与增强探针H2按照摩尔比1:2~2:1添加至缓冲液中,然后加入含有目标基因ARGs的待测样品,混合均匀后进行反应,利用荧光分光光度计检测荧光强度; 所述的目标基因ARGs为tet-A和sul-1中的一种或两种,tet-A的核酸序列: 5’-GGACAACATTGCTTGCAGCGCCGGCATTCCGA-3’; sul-1的核酸序列为: 5′-AAGAGCGGCGCAATACGTCTGATCTCATCGGC-3′; 所述的荧光探针DNA银纳米簇H1-AgNCs的核苷酸序列为: 5’-CCTCCTTCCTCCTTTGTATTGCGCCGCTCTTTCGGAATGCCGGCGCTTATCCCTTAATCCCC-3’; 所述增强探针H2的核苷酸序列为: 5’-TTTTTTTTTTTTATAGCAAGCAATGTTGTCCGCCGATGAGATCAGACAAAGGGTGGGGTGGGGTGGGG-3’; 反应温度为4~50℃,反应时间为5~75min; 荧光分光光度计参数设定:激发波长:495nm和580nm,发射波长范围为:520~650nm和600~720nm,激发狭缝和发射狭缝为10nm,扫描电压为700V; 检测目标基因tet-A时,绿色荧光被点亮,所述荧光反应体系的pH为3.6~5.0;检测目标基因sul-1时,红色荧光被增强,所述荧光反应体系的pH为5.6~7.0;两种目标基因同时检测是在pH4.4的Tris-HAc缓冲液中进行。
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