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龙图腾网获悉耀海生物技术(北京)有限公司申请的专利一种含有人血清白蛋白的填料和构建方法及其应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119680525B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-16发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202411764403.3，技术领域涉及：B01J20/281；该发明授权一种含有人血清白蛋白的填料和构建方法及其应用是由刘立;左涛;王满朝设计研发完成，并于2024-12-04向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种含有人血清白蛋白的填料和构建方法及其应用在说明书摘要公布了：本发明涉及一种用于纯化可与人血清白蛋白特异性结合的的多价纳米抗体的偶联填料及其制备方法和用途。本发明具体提供了一种含有人血清白蛋白的填料以及制备方法，先将填料采用特定的方法洗涤，之后与人血清白蛋白蛋白溶液混合偶联，再进行封闭液封闭后续处理等步骤。本发明还提供了所述填料用于纯化多价纳米抗体的方法，该方法特异性高，操作条件温和，纳米抗体纯度和回收率高，有利于商业化大规模生产。

本发明授权一种含有人血清白蛋白的填料和构建方法及其应用在权利要求书中公布了：1.一种采用基于人血清白蛋白HSA的亲和层析填料用于多价纳米抗体的纯化方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤： 柱清洗：采用0.1MNaOH的清洗液清洗； 平衡：采用10mMPBS，pH=7.4的平衡液平衡； 上样：上样包含多价纳米抗体的样品； 柱清洗：采用10mMPBS，pH=7.4的清洗液清洗； 目标产物洗脱：采用20mM醋酸钠，pH=3.5的洗脱液洗脱； 柱清洗：采用0.1MNaOH的清洗液清洗； 下柱前准备：20%乙醇清洗，保存亲和层析柱； 其中，所述多价纳米抗体为三价纳米抗体Anti-EGFRAlbuminNanobody，所述Anti-EGFRAlbuminNanobody的氨基酸序列如SEQIDNO:3所示； 其中，所述基于人血清白蛋白HSA的亲和层析填料通过以下方法制备： （1）取所需量的琼脂糖填料介质至相应规格的砂芯漏斗中抽干； （2）加入2倍介质体积的预冷1mMHCl溶液，搅拌均匀后抽干；重复2次； （3）将介质转移到相应规格的反应器中； （4）将0.5-10mgml浓度的人血清白蛋白样品溶解在0.1MNaHCO3、0.5MNaCl，pH8.3溶液，加入到反应器中，室温条件下温和搅拌4h； （5）将介质转移到砂芯漏斗中抽干，保存收集容器中偶联后的溶液； （6）加入2倍介质体积的0.1MTris-HCl，pH8.0溶液，搅拌均匀后抽干；重复2次； （7）将介质转移到相应规格的反应器中，加入2倍介质体积的0.1MTris-HCl，pH8.0溶液，室温条件下温和搅拌4h； （8）将介质转移到砂芯漏斗中抽干； （9）加入2倍介质体积的0.1MTris-HCl、0.5MNaCl，pH9.0溶液，搅拌均匀后抽干； （10）加入2倍介质体积的0.1M乙酸钠、0.5MNaCl，pH3.0溶液，搅拌均匀后抽干； （11）重复步骤（9）-（10）共计2次； （12）加入2倍介质体积的20%乙醇，搅拌均匀后抽干，重复2次； （13）将介质转移到相应规格的容器中，加入等体积的20%乙醇后保存备用。

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