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湖南省林业科学院佘佳荣获国家专利权

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龙图腾网获悉湖南省林业科学院申请的专利一种黄精外泌体微囊的制备方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119632948B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-16发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411796331.0,技术领域涉及:A61K9/50;该发明授权一种黄精外泌体微囊的制备方法是由佘佳荣;郭静怡;韦淑格;刘倩;杨洁设计研发完成,并于2024-12-09向国家知识产权局提交的专利申请。

一种黄精外泌体微囊的制备方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种黄精外泌体微囊的制备方法,属于生物技术领域,通过黄精外泌体的粗提、黄精外泌体的纯化、黄精外泌体冻干粉的制备和黄精外泌体微囊的制备四步制备得到黄精外泌体微囊,将黄精外泌体包裹在高分子材料形成的微小囊泡中,从而有效隔绝外界环境,为外泌体提供一个保护屏障,防止在外部环境中降解或失活,从而提高其稳定性;同时,微囊包裹还可以保护黄精外泌体免受体内酶解和清除,延长其在体内的滞留时间,提高生物利用度;本发明制备过程简单,可操作性强,制备的外泌体微囊在抑制胃癌细胞方面具有良好的应用。

本发明授权一种黄精外泌体微囊的制备方法在权利要求书中公布了:1.一种黄精外泌体微囊的制备方法,其特征在于:包括黄精外泌体的粗提、黄精外泌体的纯化、黄精外泌体冻干粉的制备和黄精外泌体微囊的制备四步; 具体包括以下步骤: 1)以重量份计,将100份洗净切碎后的鲜黄精加入200份甘油和10mmolL的磷酸盐缓冲液混合液中,利用榨汁机榨汁,得到黄精汁,过滤,所得滤液在4℃下,以8000rmin的速度离心0.5~1h,收集上清液; 2)将步骤1)得到的上清液使用0.45μm的滤膜过滤,所得滤液浓缩,所得浓缩液加入聚乙二醇8000中,在4℃、100~300rmin下搅拌12~24h后,在4℃、12000rmin下离心15~30min,所得沉淀物加入10mmolL的磷酸盐缓冲液溶解,离心,收集上清液,得到黄精外泌体粗提物; 3)将步骤2)制得的黄精外泌体粗提物采用色谱柱纯化,得到精制黄精外泌体溶液; 4)将步骤3)制得的精制黄精外泌体溶液配置成黄精外泌体冻干液,经0.22μm的无菌滤膜过滤后,在-30~-40℃、10~80Pa下冷冻干燥20~30h,得到黄精外泌体冻干粉; 5)向步骤4)制备的黄精外泌体冻干粉中加入质量浓度为80%的乙醇和质量浓度为5%的阿拉伯胶水溶液,再加入吐温-80,搅拌混合均匀,得到混合液,将得到的混合液滴入1%壳聚糖溶液中,恒温搅拌均匀,得到混合乳液,利用氢氧化钠调节混合乳液的pH为3.8~4.2,再向其中加入一倍体系量的蒸馏水,冷却至30~35℃,冰水浴中搅拌,用质量浓度为20%的甲醛水溶液调节体系pH为8~9,搅拌2~3h后,预冻12~15h,烘干20~24h,得到黄精外泌体微囊; 步骤4)中所述黄精外泌体冻干液,以重量份计,由以下原料组成:82~85份精制黄精外泌体溶液、3~5份聚乙二醇1500、5~8份甘油、6~8份甘露醇和4~6份磷酸化修饰改性海藻糖; 所述磷酸化修饰改性海藻糖按照如下方法制备得到: 以重量份计,将6~8份三聚磷酸钠和1份三偏磷酸钠加入8~10份蒸馏水中,搅拌溶解后,得到复合磷酸盐溶液,再向其中加入5~8份海藻糖,充分溶解后,用氢氧化钠调节体系pH值为9,将得到的反应液置于90℃恒温水浴震荡器中,反应7~10h后,冷却至25~30℃后,加入4~6份质量浓度为95%的乙醇中,静置反应12~24h,再在4℃、5000rmin下离心10~30min,所得沉淀使用2~4份蒸馏水溶解,再使用2~4份无水乙醇醇沉2~3次,离心,所得固体经透析、冷冻干燥,得到磷酸化修饰改性海藻糖。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人湖南省林业科学院,其通讯地址为:410000 湖南省长沙市天心区长沙市韶山南路658号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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