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龙图腾网获悉天津科技大学申请的专利一株无质粒、以廉价碳源为底物从头高效合成γ-氨基丁酸的基因工程菌、方法和应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN120098883B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-16发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202510592031.9，技术领域涉及：C12N1/21；该发明授权一株无质粒、以廉价碳源为底物从头高效合成γ-氨基丁酸的基因工程菌、方法和应用是由范晓光;付永康;温昊妍;陆盼;徐庆阳;陈宁设计研发完成，并于2025-05-09向国家知识产权局提交的专利申请。

本一株无质粒、以廉价碳源为底物从头高效合成γ-氨基丁酸的基因工程菌、方法和应用在说明书摘要公布了：本发明属于基因工程技术领域，公开一株无质粒、以廉价碳源为底物从头高效合成γ‑氨基丁酸的基因工程菌、方法和应用，工程菌是在野生型E.coliMG1655的基础上，过表达T7RNA聚合酶基因；缺失基因gabT和puuE；过表达gadC、gadbm、gdh、gltA、pyc、ppc基因；使用生长偶联型启动子动态调控大肠杆菌生产GABA通路中的sucA和argA基因表达。本工程菌的基因操作均在基因组上进行，无质粒残留，无抗生素及诱导剂使用，生产性能稳定，发酵过程简单。利用工程菌在分阶段pH值控制工艺下发酵38h，γ‑氨基丁酸产量可达到35.4gL，具有较好的工业应用价值。

本发明授权一株无质粒、以廉价碳源为底物从头高效合成γ-氨基丁酸的基因工程菌、方法和应用在权利要求书中公布了：1.一株无质粒、以廉价碳源为底物从头高效合成γ-氨基丁酸的基因工程菌，其特征在于：所述基因工程菌是在野生型大肠杆菌E.coliMG1655的基础上，过表达噬菌体来源的T7RNA聚合酶基因T7RNAP，由木糖启动子P xylF 控制；缺失了GABA转氨酶基因gabT和puuE；过表达大肠杆菌内源的GABA转运蛋白酶基因gadC；过表达巨大芽孢杆菌来源的谷氨酸脱羧酶基因gad bm ；过表达谷氨酸棒状杆菌来源的谷氨酸脱氢酶基因gdh即cgl2079；过表达大肠杆菌内源的柠檬酸合酶基因gltA；过表达谷氨酸棒状杆菌来源的丙酮酸羧化酶基因pyc即cgl0689；过表达大肠杆菌内源的磷酸烯醇丙酮酸羧化酶基因ppc；使用生长偶联型启动子P rpst 动态调控大肠杆菌生产GABA通路中的2-酮戊二酸脱氢酶基因sucA和氨基酸N-乙酰转移酶基因argA； 所述基因gabT在GeneBank的登记号为GeneID948067，基因puuE在GeneBank的登记号为GeneID945446，基因gadC在GeneBank的登记号为GeneID946057，基因gad bm 在GeneBank的登记号为KT895523.1，基因gdh在GeneBank的登记号为GeneID1020031，基因gltA在GeneBank的登记号为GeneID945323，基因pyc在GeneBank的登记号为GeneID1019553，基因ppc在GeneBank的登记号为GeneID948457，基因sucA在GeneBank的登记号为GeneID945303，基因argA在GeneBank的登记号为GeneID947289； 基因T7RNAP的序列为SEQIDNO.1；木糖启动子P xylF 的序列为SEQIDNO.2；三种生长偶联型启动子中P rpst 的序列为SEQIDNO.3； 所述的基因工程菌的构建方法，所述方法是采用CRISPRCas9介导的基因编辑技术对E.coliMG1655基因组进行定向改造； 具体步骤如下： （1）在大肠杆菌E.coliMG1655基因组上lacI-lacZ位点整合T7噬菌体来源的RNA聚合酶基因T7RNAP，由木糖启动子P xylF 控制； （2）敲除GABA转氨酶基因gabT； （3）敲除GABA转氨酶基因puuE； （4）在假基因位点yjgX整合大肠杆菌内源的GABA转运蛋白酶基因gadC，由P trc 启动子控制； （5）在假基因位点yciQ整合来自巨大芽孢杆菌内源的谷氨酸脱羧酶基因gad bm ，由PT7启动子控制； （6）在假基因位点mbhA整合来自谷氨酸棒状杆菌的谷氨酸脱氢酶基因gdh即cgl2079，由强启动子P trc 控制； （7）在假基因位点ylbE整合来自大肠杆菌内源的柠檬酸合酶基因gltA,由P trc 启动子控制； （8）在假基因位点yghE整合来自谷氨酸棒状杆菌来源的丙酮酸羧化酶基因pyc即cgl0689，由P trc 启动子控制； （9）在假基因位点gapC整合来自大肠杆菌内源的磷酸烯醇丙酮酸羧化酶基因ppc； （10）使用生长偶联型启动子P rpst 替换2-酮戊二酸脱氢酶基因sucA的天然启动子； （11）使用生长偶联型启动子P rpst 替换氨基酸N-乙酰转移酶基因argA的天然启动子。

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