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龙图腾网获悉重庆海关技术中心申请的专利基于阵列模式和CRISPR/Cas12a的羊痘病毒属分型检测试剂盒及试纸条试剂盒获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115074466B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-12发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202210770266.9，技术领域涉及：C12Q1/70；该发明授权基于阵列模式和CRISPR/Cas12a的羊痘病毒属分型检测试剂盒及试纸条试剂盒是由聂福平;曹改花;史梅梅;熊亦帆;侯长军;杨俊;王昱;李应国;霍丹群;王国民设计研发完成，并于2022-06-30向国家知识产权局提交的专利申请。

本基于阵列模式和CRISPR/Cas12a的羊痘病毒属分型检测试剂盒及试纸条试剂盒在说明书摘要公布了：本发明公开了一种基于阵列模式和CRISPRCas12a的羊痘病毒属分型检测试剂盒及试纸条试剂盒。首先基于VARVB22R和RPO30基因进行PCR扩增，扩增产物包含了LSDV、SPPV和GTPV的特异性区域。随后利用CRISPRCas12a系统对扩增产物进行特异性识别。基于两对引物和3个CRISPRCas12a系统构建荧光阵列模式，对LSDV、SPPV和GTPV进行准确、特异性地鉴别。在CRISPRCas12a系统和PCR扩增模式下，针对LSDV、SPPV和GTPV的实际检测分别低至50copies，40copies，60copies。另外，采用CRISPRCas12a专用试纸条结合阵列模式实现了对CaPV分型的Point‑of‑care检测，方便养殖户或者企业对病毒的监测和鉴别。相比与其他分型的检测方法，本发明基于阵列模式可以更加准确和全面地对LSDV、SPPV和GTPV的鉴别，并具有更高的灵敏度。

本发明授权基于阵列模式和CRISPR/Cas12a的羊痘病毒属分型检测试剂盒及试纸条试剂盒在权利要求书中公布了：1.基于阵列模式和CRISPRCas12a的羊痘病毒属分型检测试剂盒，其特征在于：包括两对引物和三条crRNA序列，其序列如下所示： B22R-Forward引物：5’-CTTTTTCCATGATATGGTGGGC-3’ B22R-Reverse引物：5’-TGAATGTGATCTCATATCCTTATTG-3’ RPO30-Forward引物：5’-TCTATGTCTTGATATGTGGTGGTAG-3’ RPO30-Reverse引物：5’-AGTGATTAGGTGGTGTATTATTTTCC-3’ crRNA1序列： 5’-AAUUUCUACUAAGUGUAGAUUAAAAAAAGAAAAAAAAAAAG-3’ crRNA2序列： 5’-AAUUUCUACUAAGUGUAGAUAUACAAAUAAAUAAAUUGCUU-3’ crRNA3序列： 5’-AAUUUCUACUAAGUGUAGAUUACUGAAGUUGUUUAUUUUCA-3’ 进行羊痘病毒属分型检测时，包括两个体系： PCR体系：2×ExTaqProbeqPCRMIX12.5μL,1μL10μMB22R-Forward引物和B22R-Reverse引物、或者RPO30-Forward引物和RPO30-Reverse引物，8.5μLddH2O和2μL待检样品；扩增程序为：95℃5min；35个循环：95℃10s，55℃15s和72℃15s；最后，72℃10min延伸；分别扩增B22R和RPO30基因； CRISPRCas12a体系：取B22R扩增反应液4μL分别加入到crRNA1和crRNA2的CRISPRCas12a体系中；取4μLRPO30基因扩增液加入到crRNA3的CRISPRCas12a体系中；CRISPRCas12a包含1μMLbCas12a2μL,1μMcrRNA2μL,1μL10μMssDNA-FQreporter,2μL10×NEBbuffer2.1和9μLddH2O；所述crRNA为crRNA1序列、crRNA2序列或crRNA3序列，分别构建包含crRNA1、crRNA2、crRNA3的CRISPRCas12a体系。

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