安徽医科大学赵洁旻获国家专利权
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龙图腾网获悉安徽医科大学申请的专利一种工程化DNA晶体结晶后功能化方法和应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN117384231B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-12发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202311154931.2,技术领域涉及:C07H21/04;该发明授权一种工程化DNA晶体结晶后功能化方法和应用是由赵洁旻;冯昕瑜;张玲玲;韦书恒;徐莉设计研发完成,并于2023-09-08向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种工程化DNA晶体结晶后功能化方法和应用在说明书摘要公布了:本发明公开一种工程化DNA晶体结晶后功能化方法和应用。本发明构建了刚性的三角形张拉结构基元,包括3种不同的DNA组成链,共7条链,边链在三个双螺旋方向延伸,具有三次重复序列的中心链位于结构基元的中央。每个双螺旋结构的两端各带有2个碱基的粘性末端,其互相作用形成非常有序的3D晶体网络。使用T4DNA连接酶连接粘性末端,得到稳定的DNA晶体。本发明的晶体结构稳定,目的中心链可以添加复杂修饰,具有普适性,该晶体在医学疾病检测中具有广泛的用途。
本发明授权一种工程化DNA晶体结晶后功能化方法和应用在权利要求书中公布了:1.一种工程化DNA晶体的功能化方法,其特征在于,将所述工程化晶体浸泡在DMSO中,然后吸去DMSO,用1×TAEMg清洗晶体8-10次,再向晶体液滴滴加功能性的中心链,移液枪抽吸混合均匀,静置过夜即可; 所述中心链是L4链或L-CY5链; 所述L4链的核苷酸序列为:5’-GAGGAAAAAAAAAAATCCTCCGGTATTCACCACGATGCGGTATTCACCACGATGCGGTATTCACCACGATG-3’; L-CY5链:5’-CGGTATTCACCACGATGCGGTATTCACCACGATGCGGTATTCACCACGATG-3’; 所述工程化DNA晶体的制备方法包括如下步骤: (1)将组成三角形张拉结构基元的三条DNA单链按照化学计量比混合,从95℃逐渐降温至4℃,形成相应的基元模块;所述三条DNA单链分别为中心链L链、边链M链、角链S链,每条S链的两端部分分别与两条M链的一个末端部分互补配对,互补配对碱基数分别为12个或11个;并且(1)每条M链和S链的粘性末端为两个碱基长度;(2)每条M链为42个碱基长度;且从5'端到3'端被分成三段,各段碱基数需为13、17、12;(3)每条L链为三段重复序列,并在三角形张拉结构基元的中心分别与三条M链中间部分互补配对,L链与每条M链互补配对的长度为17个碱基; 其中,L链:5’-CGGTATTCACCACGATGCGGTATTCACCACGATGCGGTATTCACCACGATG-3’; M链:5’-GAAAAACACTGCCTGAATACCGCATCGTGGACTGACTCAAAA-3’; S链:5’-TCTTTTGAGTCAGTGGCAGTGTTTT-3’; 且每条DNA单链的最终浓度为2~6μM; (2)用悬滴蒸气扩散法进行结晶,得到晶体;结晶条件:在30-35℃,结晶溶液盐浓度为0.4-0.6×TAEMg,结晶液池盐浓度为4-6×TAEMg条件下进行; (3)将加固溶液加入第(2)步得到晶体溶液中,过夜即得到加固好的工程化DNA晶体;所述加固溶液包括8-12×TAEMg、8-12mMATP、400-1000UμLT4DNA连接酶和水。
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