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龙图腾网获悉中国科学院生态环境研究中心申请的专利基于中药成分的胆碱能神经元分化方法及试剂盒获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115975927B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-09发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310096480.5，技术领域涉及：C12N5/0793；该发明授权基于中药成分的胆碱能神经元分化方法及试剂盒是由杨珺涵;杨仁君;殷诺雅;费凡设计研发完成，并于2023-01-19向国家知识产权局提交的专利申请。

本基于中药成分的胆碱能神经元分化方法及试剂盒在说明书摘要公布了：一种基于中药成分的胆碱能神经元分化方法及试剂盒，该方法包括：使用包含小分子制剂的第一培养基诱导人诱导多能干细胞分化至神经外胚层阶段细胞；使用包含Hedgehog通路激活剂的第二培养基诱导神经外胚层细胞分化至内侧神经节隆起细胞；使用包含中药成分的第三培养基诱导内侧神经节隆起细胞分化至成熟的胆碱能神经元，其中中药成分包括虎杖苷、芍药苷、红景天苷和二苯乙烯苷。本发明的该方法在切实可行的基础上具有高效、低成本等特点，从细胞形态和标志基因的表达上可以确定本发明定向、高效地分化至胆碱能神经元。从而为基于各种胆碱能神经元的研究提供更方便、快捷有效的细胞来源方案。

本发明授权基于中药成分的胆碱能神经元分化方法及试剂盒在权利要求书中公布了：1.一种基于中药成分的胆碱能神经元分化方法，包括以下步骤： 使用包含小分子制剂的第一培养基诱导人诱导多能干细胞分化至神经外胚层细胞，其中所述小分子制剂包括TGF-ß通路抑制剂SB431542、BMP通路抑制剂LDN193189和mTOR通路激活剂丙戊酸，SB431542的浓度为5~10μM，LDN193189的浓度为5~500nM，丙戊酸的浓度为0.05~100μM，所述第一培养基还包括DMEMF12培养基、64mgL维生素C磷酸镁酯、14μgL硒酸钠、10.7mgL转铁蛋白、19.4mgL胰岛素和543mgL碳酸氢钠； 使用包含Hedgehog通路激活剂Purmorphamine的第二培养基诱导所述神经外胚层细胞分化至内侧神经节隆起细胞，Purmorphamine的浓度为0.5~2μM，所述第二培养基还包括97%Neurobasal培养基、1%N2补充剂和2%B-27补充剂； 使用包含中药成分的第三培养基诱导所述内侧神经节隆起细胞分化至成熟的胆碱能神经元，其中所述中药成分包括虎杖苷、芍药苷、红景天苷和二苯乙烯苷，虎杖苷的浓度为0.01~10μM，芍药苷的浓度为0.01~10μM，红景天苷的浓度为0.01~10μM，二苯乙烯苷的浓度为0.01~10μM，所述第三培养基还包括97%Neurobasal培养基、1%N2补充剂和2%B-27补充剂。

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