广东金作农业科技有限公司;广东省农业科学院作物保护研究所李智军获国家专利权
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龙图腾网获悉广东金作农业科技有限公司;广东省农业科学院作物保护研究所申请的专利一种用于简便整体花粉甲基绿染色法的染色液和褪色/分色液获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115308005B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-05发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202210877172.1,技术领域涉及:G01N1/30;该发明授权一种用于简便整体花粉甲基绿染色法的染色液和褪色/分色液是由李智军;曾晶;谭铭喜;韩玉琴设计研发完成,并于2022-07-25向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种用于简便整体花粉甲基绿染色法的染色液和褪色/分色液在说明书摘要公布了:本发明公开了一种用于简便整体花粉甲基绿染色法的染色液和褪色分色液,所述染色液由甲基绿、氯化锰、硫酸锰、乙醇和乙酸组成,所述褪色分色液由三乙醇胺、乙醇和甘油组成。本发明基于甲基绿选择性与DNA结合,并利用三乙醇胺能使甲基绿褪色以及透明花粉壁的双重作用,将染色后的褪色、分色及透明过程简化成一步,不仅花粉质核染色反差清晰,而且染色效果易控,重复性好,同时操作简便、快捷,具有安全、环保、成本低的优点,可用于十字花科作物花粉以及与其具有类似结构和大小的其它作物花粉发育时期观察判定,同时还有望在植物分类、不育系转育以及花粉发育过程基因表达等研究领域获得应用。
本发明授权一种用于简便整体花粉甲基绿染色法的染色液和褪色/分色液在权利要求书中公布了:1.一种用于简便整体花粉甲基绿染色法的染色液和褪色分色液,其特征在于:所述染色液由甲基绿、氯化锰、硫酸锰、乙醇和乙酸组成;所述染色液为含0.25%(wv)甲基绿、0.2-1.0%(wv)氯化锰、0-0.5%(wv)硫酸锰、30-40%(vv)乙醇和20-30%(vv)乙酸的混合液; 所述褪色分色液由三乙醇胺、乙醇和甘油组成;所述褪色分色液中各成分的使用体积比设置为三乙醇胺:乙醇:甘油=50-75:50:0-10; 具体操作步骤如下: 步骤一:染色:吸取染色液滴于载玻片上,从花序上摘取需要染色观察的开放花朵或花蕾,摘取花药直接放入载玻片上的染色液中,轻轻捏挤花药,散出花粉,取出杂物,涂抹片刻,然后室温下静置染色; 步骤二:褪色分色:直接在染色液斑上滴加褪色分色液,然后盖上盖玻片静置,进行褪色、分色和透明; 步骤三:观察和拍照记录:在显微镜-OlympusBX51下用MicroPublisher5.0RTV相机拍照记录,且相机的物镜放大倍数40倍、目镜放大倍数10倍。
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