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龙图腾网获悉江苏省中国科学院植物研究所申请的专利一种甜菊自交系种子转基因体系的建立方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN114703217B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-02发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202210304381.7，技术领域涉及：C12N15/82；该发明授权一种甜菊自交系种子转基因体系的建立方法是由杨永恒;原海燕;张婷;孙玉明;徐晓洋设计研发完成，并于2022-03-26向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种甜菊自交系种子转基因体系的建立方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种甜菊自交系种子转基因体系的建立方法，该方法包括：取甜菊自交系种子萌发后的子叶作为外植体；将子叶放入农杆菌侵染液中进行侵染培养；将侵染后的子叶进行共培养，再进行筛选培养；将呈淡黄色、形态饱满、明显膨大的抗性愈伤组织进行不定芽筛选培养和生根培养；最后，通过GUS染色法和PCR法判断所述甜菊再生苗是否为转基因阳性植株，得到甜菊转基因植株。本发明采用甜菊自交系种子为试验材料配合特定的愈伤诱导培养基、共培养培养基、抗性愈伤筛选培养基、不定芽筛选培养基进行农杆菌介导的甜菊转基因体系的构建，不仅能够获得甜菊的转基因植株，而且大大缩短转化时间，提高转化率。

本发明授权一种甜菊自交系种子转基因体系的建立方法在权利要求书中公布了：1.一种甜菊自交系种子转基因体系的建立方法，其特征在于，包括以下步骤： 1取甜菊自交系种子清洗消毒后，置于含湿润无菌滤纸的培养皿中萌发，得到自交系幼苗； 2切下幼苗子叶，将子叶放入盛有农杆菌侵染液的离心管中进行真空侵染； 所述农杆菌侵染液的OD600值为0.4； 3侵染完成后，倒去侵染液，用无菌滤纸吸干水分，再将侵染后的子叶放入共培养培养基中进行暗培养，得到膨大的子叶愈伤； 所述共培养培养基为：2.0mgL6-BA+2.0mgLNAA+20mgLAs+MS+30gL蔗糖+6gL琼脂粉，pH5.8； 4共培养结束后，清洗子叶愈伤并晾干，晾干后将子叶愈伤移入抗性愈伤筛选培养基中进行筛选培养，直至愈伤组织有明显增殖； 所述抗性愈伤筛选培养基为：1.0mgL6-BA+0.5mgLNAA+8mgLHyg+200mgLTimentin+MS+30gL蔗糖+6gL琼脂粉，pH5.8； 5将呈淡黄色、形态饱满、明显膨大的抗性愈伤组织转移到抗性不定芽筛选培养基中进行不定芽筛选培养，得到不定芽； 所述不定芽筛选培养基为2.0mgL6-BA+0.2mgLIAA+8mgLHyg+200mgLTimentin+MS+30gL蔗糖+6gL琼脂粉，pH5.8； 6将所述不定芽切下移至生根培养基中进行生根培养，待幼根长2～3cm时进行炼苗移栽，得到甜菊转基因苗； 所述生根培养基为0.1mgLIBA+8mgLHyg+200mgLTimentin+12MS+30gL蔗糖+6gL琼脂粉，pH5.8； 7鉴定所述转基因甜菊苗是否为阳性植株，得到甜菊转基因植株； 步骤3中，所述共培养时在培养基与侵染子叶间铺一张无菌滤纸防止农杆菌过度生长；所述共培养的条件为：20～25°C黑暗培养3d； 步骤4中，共培养结束后，采用含200mgL特美汀即Timentin的灭菌水清洗子叶愈伤，清洗5遍，最后一遍浸泡10min；所述筛选培养的条件为：25～28°C、光周期12hd、光照度1500～2000Lux，筛选培养期间每两周继代一次，至有明显增殖的愈伤组织； 步骤5中，所述不定芽筛选培养的条件为：25～28°C、光周期12hd、光照度1500～2000Lux，每两周继代一次； 步骤6中，当不定芽长至0.5～1cm时，将不定芽切下，插入生根培养基中；所述生根培养的条件为：25～28°C、光周期12hd、光照度1500～2000Lux； 步骤6中，待根长2～3cm时，将幼苗从培养基中取出，洗净附着在根部表面的培养基，将其移栽到育苗盘中，株间距1.5～2.0cm，移栽基质为泥炭∶蛭石∶珍珠岩＝1∶1∶1，用喷壶喷透水，保鲜膜覆盖保湿，置于人工气候箱中培养，设置温度25～28°C、光周期12hd、湿度60％、光照度1500～2000Lux，一周后揭开保鲜膜，成活后带土移栽。

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