湖北大学张成获国家专利权
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龙图腾网获悉湖北大学申请的专利一种智能工程细菌系统及其制备和在抗肿瘤药物中的应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115960936B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-02发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211274492.4,技术领域涉及:C12N15/70;该发明授权一种智能工程细菌系统及其制备和在抗肿瘤药物中的应用是由张成;马立新;许文轩;任德宝设计研发完成,并于2022-10-18向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种智能工程细菌系统及其制备和在抗肿瘤药物中的应用在说明书摘要公布了:本发明提供了一种智能工程细菌系统及其制备和在抗肿瘤药物中的应用,所述智能工程细菌系统为装载有质粒的细菌,所述细菌对肿瘤组织具有趋向作用,所述质粒包含编码融合蛋白的基因片段,所述融合蛋白由所述细菌分泌表达,所述融合蛋白包含蛋白A、抗肿瘤肽以及连接二者且能被基质金属酶‑2靶向切割的基质金属酶‑2敏感肽,所述蛋白A能失活所述抗肿瘤肽。上述智能工程细菌系统在体外诱导表达融合蛋白后,将其注射入荷瘤小鼠体内,可在乏氧及免疫抑制驱动下细菌趋向并定殖于肿瘤部位,利用肿瘤部位高表达的基质金属酶‑2将敏感肽切断,使得抗肿瘤肽活性得以恢复并在肿瘤局部精准释放,极大提高了工程细菌抗肿瘤的效果。
本发明授权一种智能工程细菌系统及其制备和在抗肿瘤药物中的应用在权利要求书中公布了:1.一种智能工程细菌系统在制备抗肿瘤药物中的应用,其特征在于,所述智能工程细菌系统为装载有质粒的重组大肠杆菌,所述质粒包含编码融合蛋白的基因片段,所述融合蛋白由所述重组大肠杆菌分泌表达,所述融合蛋白由超折叠绿色荧光蛋白GFP、蜂毒素以及连接二者且能被基质金属酶-2靶向切割的基质金属酶-2敏感肽组成; 所述GFP通过基质金属酶-2敏感肽偶联于蜂毒素的N端,且所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示; 所述药物的给药方式为对所述重组大肠杆菌诱导表达后静脉注射给药; 所述融合蛋白的N端修饰有6*His标签,编码所述融合蛋白的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示; 所述智能工程细菌系统的构建方式包括如下步骤: 步骤1、利用PCR技术扩增目的基因片段和线性化载体,其中目的基因片段的核苷酸序列如SEQIDNO.4所示,线性化载体为含有6*His-GFP的载体,且目的基因片段与线性化载体有同源区域; 步骤2、利用T5外切酶切割线性化载体和目的基因片段的5’端同源臂,连接成环状质粒,热激转化至大肠杆菌,再对重组子进行筛选和鉴定; 步骤3、将重组质粒转化至大肠杆菌BL21DE3plysS后采用IPTG诱导表达。
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