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龙图腾网获悉中国农业科学院茶叶研究所申请的专利茶树网斑病毒侵染性克隆及其VIGS载体构建方法和应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115992168B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-09-02发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202211423011.1，技术领域涉及：C12N15/83；该发明授权茶树网斑病毒侵染性克隆及其VIGS载体构建方法和应用是由郝心愿;任恒泽;王新超;杨亚军;王璐设计研发完成，并于2022-11-15向国家知识产权局提交的专利申请。

本茶树网斑病毒侵染性克隆及其VIGS载体构建方法和应用在说明书摘要公布了：茶树网斑病毒侵染性克隆及其VIGS载体构建方法和应用，属于基因工程技术领域。侵染性克隆包含茶树网斑病毒TPLPV三个组分全长cDNA重组质粒，分别为pTPLPV1、pTPLPV1和pTPLPV3。pTPLPV3可用于插入外源基因片段构成TPLPV的VIGS载体，通过农杆菌介导法进行pTPLPV3‑VIGS单独接种或与前两条链混合侵染，可以沉默模式植物烟草的NbPDS基因并产生白化沉默表型，单独侵染可以沉默茶树CsPDS基因并产生白化沉默表型。本发明首次将茶树病毒TPLPV改造成侵染性克隆和VIGS载体，为研究该病毒蛋白功能、致病机理及沉默载体的构建和改造提供了工具载体和技术支撑。

本发明授权茶树网斑病毒侵染性克隆及其VIGS载体构建方法和应用在权利要求书中公布了：1.一种茶树网斑病毒侵染性克隆载体，其特征在于，具体通过以下步骤得到： （1）根据TPLPV基因组信息，人工合成TPLPV三个组分对应的cDNA序列，分别为TPLPV1、TPLPV2和TPLPV3，合成TPLPV3时，在其第一个ORF即移动蛋白的终止密码子前加入SacI和BamHI酶切位点，在其第二个ORF即外壳蛋白的终止密码子前加入SpeI和NcoI酶切位点； （2）将TPLPV1、TPLPV2和TPLPV3，通过同源重组构建至改造后的pCAMBIA1300上，分别得到pTPLPV1、pTPLPV2和pTPLPV3； （3）在pTPLPV3的MP和CP的3’末端分别融入GFP序列，进一步评估所用载体对TPLPV的表达效率； （4）通过农杆菌介导的注射接种法，将pTPLPV1、pTPLPV2和pTPLPV3重组病毒质粒等比混合使用，或pTPLPV3病毒重组质粒单独使用，侵染3-5叶期烟草； 所述TPLPV1、TPLPV2和TPLPV3的序列分别如SEQIDNO.1、SEQIDNO.2和SEQIDNO.3所示； 所述改造后的pCAMBIA1300质粒包含35S启动子和NOS终止子，所述35S启动子和NOS终止子序列分别如SEQIDNO.4和SEQIDNO.5所示。

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