恰根有限公司C·瑞特获国家专利权
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龙图腾网获悉恰根有限公司申请的专利富集短链核酸的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN105018470B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-29发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:201510474196.2,技术领域涉及:C12N15/10;该发明授权富集短链核酸的方法是由C·瑞特;R·西麦尔里奇;M·韦伯设计研发完成,并于2006-12-08向国家知识产权局提交的专利申请。
本富集短链核酸的方法在说明书摘要公布了:本发明涉及富集长度小于300个核苷酸的核酸的方法,该方法包括以下步骤:i提供流体相,优选水相P1,其中含有α1至少一种长度小于300个核苷酸的核酸,和α2至少一种不同于所述核酸α1的组分,ii使所述相P1接触阴离子交换基质以使所述核酸α1结合在阴离子交换基质上,iii任选用洗涤缓冲液洗涤所述阴离子交换基质,其中所述核酸α1仍旧结合于阴离子交换基质,和iv从所述阴离子交换基质上除去,优选洗脱,结合于阴离子交换基质的核酸α1以获得含有核酸α1的流体相,优选水相P2。本发明还涉及用于富集长度小于300个核苷酸的核酸的试剂盒,涉及所述试剂盒的用途,涉及阴离子交换基质的用途,并涉及治疗疾病的方法。
本发明授权富集短链核酸的方法在权利要求书中公布了:1.一种从血浆或血清的样品中富集长度小于300个核苷酸的核酸的方法,所述方法包括以下步骤: i用含有0.5moll氯化钠的裂解缓冲液裂解样品中所含的细胞,提供流体相P1,其中含有 a1至少一种长度小于300个核苷酸的核酸a1,和 a2至少一种不同于所述核酸a1的组分, ii使所述相P1接触阴离子交换基质以使所述核酸a1结合于阴离子交换基质上,其中所述阴离子交换基质包含选自下组的官能团:氨基、肼基和亚胺基, 其中所述阴离子交换基质以磁性颗粒上涂层的形式存在, 并且核酸a1与阴离子交换基质的结合在pH为4-6内,在存在0.05-0.75moll碱金属盐时进行, 其中结合所述核酸通过连续搅拌与颗粒接触的流体相P1来进行, iii随着磁性聚集体从所述相P1分离磁性颗粒,和用洗涤缓冲液洗涤所述阴离子交换基质,其中所述核酸a1仍旧结合于阴离子交换基质,和 iv从所述阴离子交换基质上用洗脱缓冲液洗脱结合于阴离子交换基质的核酸a1以获得含有核酸a1的水相P2, 洗脱缓冲液含有:含1mollTrisCl,pH9.5,400mmollKCl,100mmoll硫酸铵和30mmollMgCl2,其中所述核酸a1是miRNA和tRNA的混合物; 洗脱缓冲液含有100mmollNaCl,250mmollNaCl,400mmollNaCl,100mmollKCl,250mmollKCl或400mmollKCl,其中所述核酸a1是miRNA和tRNA的混合物; 洗脱缓冲液含有10-50mmollCaCl2,其中所述核酸a1是miRNA;或 洗脱缓冲液含有25-200mmoll的氯化铵或硫酸铵,其中所述核酸a1是miRNA。
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