中国药科大学舒畅获国家专利权
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龙图腾网获悉中国药科大学申请的专利一种基于内滤效应的用于样品中碱性磷酸酶活力测定的比率荧光分析法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115323036B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-29发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211083631.5,技术领域涉及:C12Q1/42;该发明授权一种基于内滤效应的用于样品中碱性磷酸酶活力测定的比率荧光分析法是由舒畅;胡鹏辉;黄锐艳;尹君;杨玉;梁媛设计研发完成,并于2022-09-06向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种基于内滤效应的用于样品中碱性磷酸酶活力测定的比率荧光分析法在说明书摘要公布了:本发明提供了一种基于内滤效应的用于样品中碱性磷酸酶活力测定的比率荧光分析法,属于酶活力检测技术领域。包括:将样品与孵育缓冲液混合、孵育、静置,得到静置液;将静置液与量子点溶液混合,得到混合液,以310nm激发,测定所述混合液在405nm和585nm下的荧光强度,得到585nm与405nm的荧光强度比值,定义为R,将空白样品的荧光强度比值定义为R0,得到RR0;将RR0代入公式,得到样品中碱性磷酸酶活力。本发明提出的基于内滤效应的比率荧光分析法具有无标记检测、无需样品前处理、较低的生物基质干扰的明显优势,为复杂生物基质中碱性磷酸酶活力检测提供了一种简便、灵敏、选择性、样品消耗少的新方法。
本发明授权一种基于内滤效应的用于样品中碱性磷酸酶活力测定的比率荧光分析法在权利要求书中公布了:1.一种基于内滤效应的用于样品中碱性磷酸酶活力测定的比率荧光分析法,其特征在于,包括以下步骤: 1将样品与孵育缓冲液混合、孵育、静置,得到静置液; 所述孵育缓冲液包括:50mM二乙醇胺、1mMMgCl2和200~1000μM对硝基苯磷酸二钠,pH值为7.5~11.0; 所述孵育的温度为4~45℃,所述孵育的时间为15~120min; 2将所述步骤1得到的静置液与量子点溶液混合,得到混合液,以310nm激发,测定所述混合液在405nm和585nm下的荧光强度,得到585nm与405nm的荧光强度比值,定义为R,将空白样品的荧光强度比值定义为R0,得到RR0; 所述量子点溶液包括:10mgmlMn:ZnS和0.1mgmlZnSe@ZnS; 3将所述步骤2得到的RR0代入以下公式,得到样品中碱性磷酸酶活力; 当所述样品为碱性磷酸酶ALP溶液时,公式为:RR0=0.03688CALP+0.7513,R2=0.9969,其中CALP的单位为UL; 当所述样品为血清时,公式为:RR0=0.02085CALP+1.098,R2=0.9907,其中CALP单位为:UL; 当所述样品为HepG2细胞裂解液时,公式为:RR0=0.0597CHepG2+0.9932,R2=0.9983其中CHepG2的单位:个ml。
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