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中国烟草总公司郑州烟草研究院;郑州大学陈雪梅获国家专利权

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龙图腾网获悉中国烟草总公司郑州烟草研究院;郑州大学申请的专利一种用于评价烟草烟气诱发炎症反应程度的体外细胞共培养模型的构建方法、评价方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN109207421B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-26发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:201810982996.9,技术领域涉及:C12N5/071;该发明授权一种用于评价烟草烟气诱发炎症反应程度的体外细胞共培养模型的构建方法、评价方法是由陈雪梅;李翔;谢复炜;刘惠民;华辰凤;李玉萍;田霄翌;贾培君;邢寅霈;乔梁峻;康彧设计研发完成,并于2018-08-27向国家知识产权局提交的专利申请。

一种用于评价烟草烟气诱发炎症反应程度的体外细胞共培养模型的构建方法、评价方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种用于评价烟草烟气诱发炎症反应程度的体外细胞共培养模型的构建方法、评价方法,属于烟草及卷烟烟气安全性评价技术领域。本发明通过对beas‑2b细胞在共培养板的上室实现气液界面的培养,然后进行染毒处理,将人肺巨噬细胞用CFDASE活细胞染料进行染色,染毒处理的beas‑2b细胞和染色处理的人肺巨噬细胞分别置于共培养板的上下室进行共培养,利用荧光显微镜观察和计数,评价巨噬细胞迁移的情况,再分别测定上、下室培养基检测炎症因子的表达,评价共培养体系的炎症变化,从而评价烟草烟气诱发炎症反应的程度。

本发明授权一种用于评价烟草烟气诱发炎症反应程度的体外细胞共培养模型的构建方法、评价方法在权利要求书中公布了:1.一种用于非诊断目的的评价烟草烟气诱发炎症反应程度的方法,其特征在于:包括以下步骤: 1)将beas-2b细胞置于共培养板的上室中培养,然后进行染毒处理,染毒处理的操作为: A、收集待测烟的烟气冷凝物,于溶媒中充分溶解,得到染毒母液; B、将染毒母液加入beas-2b细胞的培养基中,得到染毒液; C、将稀释至300μgmL的染毒液染毒液加入共培养板的上室中,对beas-2b细胞进行染毒; 2)将用CFDA-SE活细胞染料染色后的人肺巨噬细胞置于共培养板的下室中,与步骤1)中染毒处理的beas-2b细胞进行共培养,共培养的时间为0.5~10h; 3)从细胞水平和蛋白表达水平方面选取评价指标,划分评价等级标准,所述从细胞水平选取评价指标具体为细胞数目的测定,所述细胞数目测定为beas-2b染毒后共培养下室巨噬细胞游走至上室的荧光及进入上室的巨噬细胞数量测定,所述从蛋白表达水平选取评价指标具体为IL-6炎症因子的表达量的测定; 4)评价烟草烟气诱发炎症反应的程度; 步骤1)中beas-2b细胞置于共培养板的上室中培养所用的培养基包括BEBM基础培养基和细胞因子;所述的细胞因子包括BPE、Hydrocortisone、hEGF、Epinephrine、Insulin、Transferrin、Triiodothyronine、RetinoicAcid、GA中的至少一种; 步骤2)中人肺巨噬细胞的培养基为DMEM高糖复合培养基; 共培养体系为transwell共培养系统,共培养系统的膜孔径大小为5~8μm;对beas-2b细胞进行气液界面培养。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人中国烟草总公司郑州烟草研究院;郑州大学,其通讯地址为:450001 河南省郑州市高新区枫杨街2号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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