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信立泰(苏州)药业有限公司王敏获国家专利权

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龙图腾网获悉信立泰(苏州)药业有限公司申请的专利一种重组特立帕肽生物学活性测定方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN118667915B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-26发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202311844442.X,技术领域涉及:C12Q1/02;该发明授权一种重组特立帕肽生物学活性测定方法是由王敏;李艳;卢志新设计研发完成,并于2023-12-29向国家知识产权局提交的专利申请。

一种重组特立帕肽生物学活性测定方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种检测重组特立帕肽生物学活性的方法。具体地,选用大鼠骨肉瘤UMR‑106细胞作为检测细胞,通过测定所述细胞在重组特立帕肽作用下的cAMP水平来反映其生物学活性。本发明建立的方法曲线拟合度高,准确度好,重复性高,耐用性强,能够很好的适用于重组特立帕肽生物学活性的检测。

本发明授权一种重组特立帕肽生物学活性测定方法在权利要求书中公布了:1.一种重组特立帕肽生物学活性的检测方法,其包括以下步骤: 1取对数生长期生长状态良好的UMR-106细胞,用培养基制备成2.0×105cellsml的细胞悬液,100μl孔铺至细胞培养板,培养20h; 2用样品稀释液倍比稀释重组特立帕肽参考品和供试品,供试品为重组特立帕肽注射液,所述注射液由重组特立帕肽原液、冰醋酸、无水醋酸钠、甘露醇、间甲酚、盐酸、氢氧化钠、注射用水组成,所述样品稀释液由磷酸盐缓冲液和1mmolL的3-异丁基-1-甲基黄嘌呤组成,所述重组特立帕肽参考品和供试品的起始浓度为0.5μgml,稀释倍数为3.5,共9个浓度梯度; 3将步骤2各浓度梯度的参考品和供试品分别以100μl孔加入所述细胞培养板,与所述细胞孵育15min; 4孵育完成后,弃上清,用预冷的磷酸盐缓冲液清洗细胞; 5以150μl孔加入细胞裂解液,先后放置于≤-70℃以及37℃冻融一次,所述细胞裂解液由5mMTris和1%SDS组成,所述Tris的pH为7.5;检测cAMP含量,计算生物学活性; 所述细胞的汇合度控制在80%~90%之间,所述细胞悬液的细胞活率≥90%; 所述检测cAMP含量包括通过竞争ELISA法检测cAMP含量,在酶标板上包被cAMP抗体,加入细胞裂解物,再加入带辣根过氧化物酶HRP标记的cAMP,显色然后终止,测定450nm处的OD值; 以供试品或参考品的浓度对应的稀释倍数为X轴,以其对应的OD值为Y轴,拟合四参数方程曲线,计算半效稀释倍数EC50; 所述四参数方程如下: y=A2+A1-A21+xX0p x:供试品或参考品的浓度对应的稀释倍数; y:OD值; A1:x趋近于无穷小时,y的最小值; A2:x趋近于无穷大时,y的最大值; p:四参数曲线的斜率; X0:半效稀释倍数EC50; 供试品的相对生物学活性=供试品EC50参考品EC50×100%。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人信立泰(苏州)药业有限公司,其通讯地址为:215425 江苏省苏州市太仓市沙溪镇梦溪路1号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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