江苏华诺泰生物医药科技有限公司王海龙获国家专利权
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龙图腾网获悉江苏华诺泰生物医药科技有限公司申请的专利一种病毒循环批次培养装置及培养方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN120173703B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-26发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510639776.6,技术领域涉及:C12M1/00;该发明授权一种病毒循环批次培养装置及培养方法是由王海龙;刘公兵;齐舒雅;杨鹏;朱翔;赵斌;刘鹏;顾文龙;于一泓设计研发完成,并于2025-05-19向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种病毒循环批次培养装置及培养方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种病毒循环批次培养装置及培养方法,具体涉及病毒培养技术领域。所述装置包括固定床反应器、循环罐、水浴夹层、片载床、上篮、下篮、液体分流器和水浴夹套;其中,循环罐外侧设置有水浴夹套,以控制循环罐中的温度;循环罐的液体进入固定床反应器进行反应;固定床反应器包括上部的上篮和下部的下篮,中间部分为片载床,用于培养病毒;固定床反应器外侧设置有水浴夹层,用于控制固定床反应器中的温度,培养后的病毒经液体分流器收集。本发明的固定床反应器,细胞承受的剪切力、应力小,培养基中不需要添加消泡剂等悬浮培养成份,不需要细胞截留即可实现灌流,且灌流流速上限高,对连续细胞友好,可以十几倍或几十倍的放大病毒生产。
本发明授权一种病毒循环批次培养装置及培养方法在权利要求书中公布了:1.一种利用病毒循环批次培养装置进行病毒循环批次培养方法,其特征在于,所述方法包括: 步骤一,反应器细胞接种 ①按7×106~8×106cellsg片状载体的接种量准备细胞,细胞悬液体积=固定床反应器(1)的工作体积+循环罐(2)的最小体积,并将细胞重悬于新鲜培养基中,制备成细胞悬液; ②固定床反应器(1)中液体排出,将细胞悬液加入循环罐(2)后,培养,前3min,搅拌桨速调整为较高转速,对细胞的分布进行混匀,随后转速调整为较低转速,保持不低于6h,完成细胞吸附后,将搅拌转速再次调整为较高转速;培养结束后,开启循环罐(2)和固定床反应器(1)之间的循环;将循环罐(2)中部分液体流入固定床反应器(1)中,待液体流入完毕后,控制流速加入新鲜营养物质,同时以同样流速泵出细胞混悬液,维持细胞培养生物反应器稳定的同时,实现细胞的连续培养; 所述步骤一中,细胞培养中,较高转速是100~150rpm,吸附时较低转速为50-70rpm; 步骤二,病毒接种 ①以适合的MOI稀释毒种,将病毒维持液加入到循环罐(2)中,前3min,搅拌桨速调整为较高转速,对细胞的分布进行混匀,随后转速调整为较低转速,保持不低于6h,完成病毒吸附后,将搅拌转速再次调整为较高转速;病毒维持液的体积和细胞接种时类似,病毒维持液体积=固定床反应器(1)的工作体积+循环罐(2)的最小体积;循环罐(2)中在病毒培养所需的温度和pH下,吸附0.8-1.2h,不同的病毒调整相关参数; ②待反应至需要浓度后,加入生物缓冲剂,开启循环罐(2)和固定床反应器(1)之间的循环,转移部分病毒液至固定床反应器(1)中,继续培养; 所述步骤二中,病毒培养中,较高转速为220-300rpm,较低转速为150~200rpm; 所述病毒循环批次培养装置包括固定床反应器(1)、循环罐(2)、水浴夹层(3)、片载床(4)、上篮(5)、下篮(6)、液体分流器(7)和水浴夹套(9); 其中,循环罐(2)外侧设置有水浴夹套(9),以控制循环罐(2)中的温度;循环罐(2)的液体进入固定床反应器(1)进行反应;固定床反应器(1)包括上部的上篮(5)和下部的下篮(6),中间部分为片载床(4),固定床反应器(1)不设置搅拌装置,用于培养病毒,片载床(4)的厚度为10-20cm;循环罐(2)中的细胞悬液由下篮(6)进入,培养后的病毒液体由上篮(5)流入液体分流器(7)收集;固定床反应器(1)外侧设置有水浴夹层(3),用于控制固定床反应器(1)中的温度,循环罐(2)中设置有搅拌桨。
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