复旦大学附属中山医院;上海心妙生物科技有限公司程蕾蕾获国家专利权
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龙图腾网获悉复旦大学附属中山医院;上海心妙生物科技有限公司申请的专利检测cMyBP-C的比色-荧光双模态纳米探针及微流控芯片获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119395300B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-22发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411465899.4,技术领域涉及:G01N33/68;该发明授权检测cMyBP-C的比色-荧光双模态纳米探针及微流控芯片是由程蕾蕾;杜利辉;崔亚俊;王妍;蔡青青;何小珍设计研发完成,并于2024-10-21向国家知识产权局提交的专利申请。
本检测cMyBP-C的比色-荧光双模态纳米探针及微流控芯片在说明书摘要公布了:本发明公开一种检测cMyBP‑C的比色‑荧光双模态纳米探针及微流控芯片,属于生物医学检测及体外诊断技术领域。本发明通过提供“层层自组装”技术制备得到以UCNPs为核,以MOF为壳,装载辣根过氧化物酶和标记抗体的比色‑荧光双模态纳米探针;再根据所述探针制备得到微流控芯片,所述微流控芯片能实现对cMyBP‑C比色及荧光信号的双模态检测,解决单一信号检测中灵敏度受限、易受背景干扰、线性范围受限、光漂白现象、信号不稳定性等技术问题。
本发明授权检测cMyBP-C的比色-荧光双模态纳米探针及微流控芯片在权利要求书中公布了:1.一种比色-荧光双模态纳米探针在制备用于检测cMyBP-C的产品中的用途,其特征在于,所述比色-荧光双模态纳米探针以上转换纳米颗粒(UCNPs)为核,以金属-有机框架物(MOFs)为壳层,壳层装载辣根过氧化物酶(HRP),且壳层表面偶联标记抗体(Ab),形成比色-荧光双模态纳米探针,记为UCNP@MOF@AbHRP,其中,所述标记抗体为抗cMyBP-C抗体; 所述比色-荧光双模态纳米探针通过如下方法制备得到: (1)制备UCNPs 将稀土原料溶于去离子水中,加入一定量的高温溶剂,蒸干水分;氩气氛围下150-170℃反应1-1.5h,得到透明黄色溶液,冷却至室温;逐滴加入到含有NH4F和NaOH的甲醇溶液中,蒸干甲醇溶剂;氮气氛围下升温至290-320℃保温反应1-2h,冷却至室温;乙醇沉淀,离心,洗涤,得到上转换纳米颗粒,保存于环己烷中备用; (2)制备PEG-磷酸酯配体稳定的UCNPs 将上述制备的上转化纳米颗粒分散于含有PEG-磷酸酯配体的无水乙醇中,缓慢加热至60-70℃,反应8-10h,冷却至室温,离心,获得PEG-磷酸酯配体稳定的上转化纳米颗粒; (3)制备UCNP@MOF 将上述制备的PEG-磷酸酯配体稳定的UCNPs分散至DMF中,逐滴加入ZrOCl2•8H2O溶液,在60-65℃下反应30-40min,随后逐滴加入BDC-NH2溶液,加热至100-120℃反应1-1.5h,在UCNPs表面生长一层较薄的UIO-66-NH2外壳,重复上述UIO-66-NH2生长方法,获得理想的外壳厚度,制备得到UCNP@MOF,分散至DMF中备用; (4)制备UCNP@MOF@AbHRP 将上述制备的UCNP@MOF分散液与等体积TrisHCl缓冲液混合,加入HRP至终浓度为1.0-1.5mgmL,室温孵育8-24小时,离心,洗涤,将装载HRP的纳米颗粒重新分散,加入NHS和EDC活化,加标记抗体反应3-4小时,加入封闭液,离心,加入抗体保护液重悬备用,制备得到UCNP@MOF@AbHRP。
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