北京华龛生物科技有限公司鄢晓君获国家专利权
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龙图腾网获悉北京华龛生物科技有限公司申请的专利一种基于三维微载体细胞培养的原位传代方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN110229782B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-08-19发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:201910505614.8,技术领域涉及:C12N5/07;该发明授权一种基于三维微载体细胞培养的原位传代方法是由鄢晓君;刘伟;张昆设计研发完成,并于2019-06-12向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种基于三维微载体细胞培养的原位传代方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种基于三维微载体细胞培养的原位传代方法。本发明提供了基于三维微载体细胞培养的原位传代方法,包括如下步骤:将种子微载体接入新的微载体;所述种子微载体为培养有待传代细胞的微载体。本发明方法避免了传统二维细胞的消化传代,既可减少消化液对细胞的损伤,又可省去消化传代等繁琐的操作过程,因此在大规模培养扩增时会节省相当的人力物力,并且可获取高质量细胞。节省时间,细胞消化下来再接种到需要时间操作,而此传代方式会省去操作时间。选择原位传代,不需要用到消化液等试剂耗材,精简过程、降低成本。
本发明授权一种基于三维微载体细胞培养的原位传代方法在权利要求书中公布了:1.一种基于三维细胞微载体培养的动态原位传代方法,包括如下步骤: (A1)制备新的微载体悬液:将新的微载体置于内置叶轮细胞培养瓶中,按照1~2000μL:1mg微载体的比例加入细胞培养基,静置或搅拌0h以上,不含0h,得到所述新的微载体悬液; (A2)制备种子微载体悬液:所述种子微载体中的细胞密度为1万-100万细胞mg微载体,用细胞培养基将所述种子微载体重悬至0.1-50mgmL,得所述种子微载体悬液; (A3)接种:将(A2)中制备的所述种子微载体悬液混入(A1)装有所述新的微载体悬液的所述内置叶轮细胞培养瓶中,所述种子微载体与所述新的微载体的比例为0.0002-200mg种子微载体mg新的微载体,加入细胞培养基调整微载体与培养基的比例至1mg:1~1000μL,将所述内置叶轮细胞培养瓶置于搅拌器上并放入培养箱中进行搅拌,搅拌时长为24至100小时; (A4)培养:继续搅拌,完成所述动态原位传代; 所述搅拌速度为20rpm-60rpm,所述搅拌为恒速搅拌或变速交替式或变速循环式搅拌,搅拌方向为顺时搅拌,逆时搅拌或交替方向的搅拌; 所述微载体为3DFloTrix微载体; 所述细胞为贴壁动物细胞;所述动物细胞为间充质干细胞。
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