常州佳德医药科技有限公司张文超获国家专利权
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龙图腾网获悉常州佳德医药科技有限公司申请的专利一种羰基还原酶不对称还原制备(-)-5-氮杂螺[2,4]庚烷-7-醇的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115466755B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-29发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211298841.6,技术领域涉及:C12P17/10;该发明授权一种羰基还原酶不对称还原制备(-)-5-氮杂螺[2,4]庚烷-7-醇的方法是由张文超;吕列超;于佳;张林设计研发完成,并于2022-10-24向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种羰基还原酶不对称还原制备(-)-5-氮杂螺[2,4]庚烷-7-醇的方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种羰基还原酶不对称还原制备‑‑5‑氮杂螺[2,4]庚烷‑7‑醇的方法,包括羰基还原酶冻干粉的制备、‑‑5‑氮杂螺[2,4]庚烷‑7‑醇的制备两步,反应路线短,操作步骤简单,具有原料便宜易得、利用率高、反应时间快、反应条件温和、产物手性纯度高、环境污染少等优点;本发明方法制备的‑‑5‑氮杂螺[2,4]庚烷‑7‑醇的收率在85%以上以5‑氮杂螺[2,4]庚烷‑7‑酮计、目标产物ee值为100%。
本发明授权一种羰基还原酶不对称还原制备(-)-5-氮杂螺[2,4]庚烷-7-醇的方法在权利要求书中公布了:1.一种羰基还原酶不对称还原制备--5-氮杂螺[2,4]庚烷-7-醇的方法,其特征在于,包括如下步骤: S1:羰基还原酶冻干粉的制备,将ATCC7330菌株接种到Luria-Bertani液体培养基上,接种量为1%,培养基中氯霉素含量为100μgmL,培养温度为25℃,220rpm培养24h,当测得OD600浓度为0.6时加入异丙基-β-D-硫代半乳糖苷并使其浓度为0.4mM,25℃诱导16h,诱导结束后,离心收集菌体,经洗菌、重悬、超声破碎后冻干,获得羰基还原酶冻干粉; S2:将步骤S1制备的羰基还原酶冻干粉、辅酶、辅酶循环酶、缓冲液和溶剂混合制备成反应体系溶液,将5-氮杂螺[2,4]庚烷-7-酮加入反应体系溶液中,在羰基还原酶的催化下,5-氮杂螺[2,4]庚烷-7-酮进行不对称还原反应生成--5-氮杂螺[2,4]庚烷-7-醇,--5-氮杂螺[2,4]庚烷-7-醇的收率在85%以上、ee值为100%; 所述的步骤S2中,5-氮杂螺[2,4]庚烷-7-酮和羰基还原酶在反应体系溶液中的质量浓度比为1:0.1~1,其中5-氮杂螺[2,4]庚烷-7-酮质量浓度为3.5%;辅酶为NADPH或NADH,辅酶与羰基还原酶冻干粉的质量投料比为1:20~100;所述的辅酶循环酶为甲酸脱氢酶,甲酸脱氢酶与羰基还原酶冻干粉的质量投料比为1:1.25;所述的步骤S2中,羰基还原酶的催化反应温度为10~50℃,反应时间为1~2h,反应体系溶液的pH为6.5~8.0。
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