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河南省人民医院袁慧娟获国家专利权

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龙图腾网获悉河南省人民医院申请的专利一种用于阻塞性呼吸睡眠暂停综合征的微生态动物模型获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115644136B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-29发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211411157.4,技术领域涉及:A01K67/02;该发明授权一种用于阻塞性呼吸睡眠暂停综合征的微生态动物模型是由袁慧娟;汤莎莎;韦伟;吕英华;李莉;刘亚雷;衡红艳;胡依萌设计研发完成,并于2022-11-11向国家知识产权局提交的专利申请。

一种用于阻塞性呼吸睡眠暂停综合征的微生态动物模型在说明书摘要公布了:本发明公开了一种用于阻塞性呼吸睡眠暂停综合征的微生态动物模型,包括构建OSA事件变化趋势拟合模型、选择目标动物并进行预处理、制备动物模型、获取粪便样品以及DNA提取和16SrRNA高通量测序等步骤。本发明通过构建呼吸睡眠暂停事件变化趋势拟合模型,获取呼吸暂停次数与时间的拟合数学关系,并建立以SD大鼠的动物模型,根据获取的拟合数学关系,对实验组的动物模型给予周期性的氧气供应,以建立用于研究阻塞性呼吸睡眠暂停综合征的肠道菌群模型,可以模拟患者在睡眠过程中的实际生理环境,根据患者呼吸睡眠暂停事件持续时间变化趋势建立与实际情况更加相符的微生态动物模型,使得菌群结构检测结果更加精确。

本发明授权一种用于阻塞性呼吸睡眠暂停综合征的微生态动物模型在权利要求书中公布了:1.一种用于阻塞性呼吸睡眠暂停综合征的微生态动物模型,通过构建OSA事件变化趋势拟合模型,获取呼吸暂停次数与时间的拟合数学关系,并以SD大鼠建立动物模型,根据获取的拟合数学关系,对实验组的动物模型给予周期性的氧气供应,使内部的氧气含量与供氧时段和呼吸暂停次数-时间变化的数学函数关系相对应,以建立用于研究阻塞性呼吸睡眠暂停综合征的微生态动物模型,其特征在于:所述微生态动物模型的构建步骤为: 步骤一:构建OSA事件变化趋势拟合模型 通过对OSAHS的相关性影响因子进行统计分析,获取呼吸暂停次数与时间的拟合数学关系; 具体步骤为:设计建立OSAHS患者OSA事件采集试验,对若干名OSAHS患者进行测试,将所有患者整夜总记录时间平均分为R、N1、N2、N3期4段,计算每个睡眠时段的相关性影响因子,并比较各个指标在不同睡眠时段的变化趋势,绘制呼吸暂停次数-时间变化曲线进行拟合分析,并根据分析结果获得呼吸暂停次数-时间变化的数学函数关系; 所述相关性影响因子包括睡眠呼吸暂停低通气指数AHI、阻塞性呼吸暂停指数OAI、平均呼吸暂停持续时间MAD、最长呼吸暂停持续时间LAD、血氧饱和度的时间占总睡眠时间百分比、快速动眼期、睡眠期、非快速动眼睡眠的N1、N2、N3期睡眠占总睡眠时间的百分比; 所述指标包括睡眠呼吸暂停低通气指数、呼吸低通气指数、平均血氧饱和度、最低血氧饱和度、氧减饱和度指数、平均收缩压、平均舒张压; 所述呼吸暂停次数-时间变化的数学函数关系的获取步骤为: S1:根据试验数据,获取患者初始呼吸暂停次数与初始平均呼吸暂停时间的坐标点集合(),并分别以为横纵坐标绘制坐标点集合的散点图; S2:计算与集合区域内初始呼吸暂停次数所对应的所有平均呼吸暂停时间yi数值的平均值,其中i=2、4、6、、、n; S3:通过步骤S2获取患者初始呼吸暂停次数与平均呼吸暂停时间平均值的坐标点集合(),并分别以为横纵坐标再次绘制坐标点集合的散点图,然后对散点图进行曲线拟合,获得呼吸暂停次数-时间变化的数学函数关系式; 步骤二:选择目标动物并进行预处理 具体步骤为:选用32只五到六周龄且体重在250±10g的清洁级SD大鼠作为目标动物,开始为期4周的研究,将选取的目标动物安置在有温度和灯光控制的房间,饲养在标准笼子里,使用消毒的标准食品饲养; 步骤三:制备动物模型 具体步骤为:将选用的SD大鼠随机均分为两组,分别为常规组及对照组,其中常规组的SD大鼠置于常规饲养室,对照组的大鼠置于对照舱内部饲养,给予两组大鼠相同的饲料和饮水时间及喂养量,其中,所述对照舱设有用于控制舱内氧气含量与供氧时间的环境控制系统,且所述的环境控制系统在大鼠睡眠时间占主导的9am~9pm时间段内根据步骤一获取的呼吸暂停次数-时间变化的数学函数关系,给予周期性的氧气供应,使对照舱内部的氧气含量与供氧时段和呼吸暂停次数-时间变化的数学函数关系相对应,持续周期为4周,常规组的饲养室内部供氧量保持与室内环境相同; 步骤四:获取粪便样品 具体步骤为:使对照舱内部的氧气含量与供氧时段和呼吸暂停次数-时间变化的数学函数关系相对应,并连续处理4周给予周期性的氧气供应结束后,分别采集每只大鼠的新鲜粪便,并放入提前标记好的1.5mL无菌离心管中,于-80℃保存备用; 步骤五:DNA提取和16SrRNA高通量测序 具体步骤为:取用步骤四获得的冰冻大鼠新鲜粪便,解冻,使用DNA提取试剂盒提取大鼠粪便中总DNA,并使用分光光度计测定DNA的浓度,采用1.0%溴化乙锭琼脂糖凝胶电泳测定DNA质量,然后提取分离的粪便全基因组DNA为样本,扩增粪便中细菌16SrRNA基因的V3V4可变区,使用2%琼脂糖凝胶电泳检测PCR扩增产物,利用AxyPrepDNA凝胶回收试剂盒对目的片段进行切胶回收,使用微型荧光计对纯化后的片段进行定量检测,根据定量结果对各样本进行相应比例混合,利用测序仪进行测序,并定量分析与数据库比对进行物种注释,基于物种注释结果进行样品物种分类划分,从而对所有的SD大鼠测序样本的粪便微生物群进行分类。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人河南省人民医院,其通讯地址为:450003 河南省郑州市金水区纬五路7号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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