华南农业大学曾灶海获国家专利权
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龙图腾网获悉华南农业大学申请的专利一种香蕉枯萎病热带4号生理小种的快速检测法及应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116287374B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-07-29发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310007668.8,技术领域涉及:C12Q1/6895;该发明授权一种香蕉枯萎病热带4号生理小种的快速检测法及应用是由曾灶海;张可煜;夏瑞;郑淇;陈程杰;徐婧;刘元龙设计研发完成,并于2023-01-04向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种香蕉枯萎病热带4号生理小种的快速检测法及应用在说明书摘要公布了:本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种香蕉枯萎病热带4号生理小种的快速检测法,该检测方法将LAMP引物技术和CRISPRCas12a偶联,利用LAMP高特异性、灵敏度强、可在短时间内大量扩增基因序列的特点,以及CRISPRCas12a精准剪切、高灵敏度的特点构建香蕉枯萎病热带4号生理小种快速检测方法,与目前运用较广的荧光定量PCR技术相比,本发明LAMP‑CRISPRCas12a偶联测定香蕉枯萎病菌株的技术有所需时间更短,实验器材简便,检测成本较低,且灵敏度和特异性无异于q‑PCR,为香蕉枯萎病的前期防治提供了简便、高效的工具。
本发明授权一种香蕉枯萎病热带4号生理小种的快速检测法及应用在权利要求书中公布了:1.一种香蕉枯萎病热带4号生理小种的鉴定系统,其特征是:包括LAMP反应体系和CRISPRCas12a介导的剪切体系; 所述LAMP反应体系包括NEBWarmStart®LAMP和引物混合体系,所述引物混合体系包括FIP和BIP,F3和B3,LF和LB,香蕉枯萎病DNA模板;无酶双蒸水; 所述引物的序列为:F3:ACTGCAGTGATTGCAGTGAT B3:TTCGACGGGGAGATTGGT FIP:GCAGAGCGCCTGACATAAGGGAGCTGCGAGACGAACCAT BIP:ATTTTCGGCTTAGAGCTCGCGACTGGCCGAGCTTATTGGC LF:GGGAGTGTAAGCGGGACA LB:TTGCTGCCCCAAAGCCC; 所述CRISPRCas12a介导的剪切体系包括Cas12a蛋白、crRNA、带FAM基团和荧光猝灭基团单链DNA探针以及无酶双蒸水,所述crRNA的序列为GAAUUUCUACUGUUGUAGAU-GGGCAGCAACUUCGCGAGCUCUAA。
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